CycLuc1
目录号 : GC34894CycLuc1是一种合成的、具有血脑屏障通透性的荧光素酶底物,最大发射波长λmax=604nm。
Cas No.:1247879-16-8
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
CycLuc1 is a synthetic, brain-permeable luciferase substrate, with maximum emission wavelength λmax=604nm[1]. CycLuc1 can be used for fluorescence imaging analysis in vivo and in vitro characterization studies of mutant luciferase[2].
CycLuc1 has been used to monitor intracranial glioblastoma (GBM) xenograft tumor growth in athymic nude mice at doses of 5-25mg/kg[3]. Intraperitoneal injection of CycLuc1 at 15mg/kg significantly enhanced in vivo bioluminescence imaging of gene expression in the sub-forniceal organ (SFO) or hypothalamic paraventricular nucleus (PVN) within male C57BL/6 mice (8-10 week of age) [4]. After intravenous (iv) injection of CycLuc1 (5mmol/L) in Pathogen-free BALB/c, FVB/N, C57BL/6 and luciferase-expressing transgenic mice (FVB-Tg(CAG-luc,-GFP)L2G85Chco/FathJ), the CycLuc1 signal peaked 4-5 minutes and then produced a stable signal that lasted for more than 60 minutes[5].
References:
[1] Kuchimaru T, Iwano S, Kiyama M, et al. A luciferin analogue generating near-infrared bioluminescence achieves highly sensitive deep-tissue imaging[J]. Nature communications, 2016, 7(1): 11856.
[2] Harwood K R, Mofford D M, Reddy G R, et al. Identification of mutant firefly luciferases that efficiently utilize aminoluciferins[J]. Cell Chemical Biology, 2011, 18(12): 1649-1657.
[3] Gupta S K, Kim M, Marin B M, et al. Synthetic luciferin, CycLuc1, improves bioluminescence imaging for intracranial glioblastoma xenografts[J]. Cancer Research, 2018, 78(13_Supplement): 4112-4112.
[4] Simonyan H, Hurr C, Young C N. A synthetic luciferin improves in vivo bioluminescence imaging of gene expression in cardiovascular brain regions[J]. Physiological Genomics, 2016, 48(10): 762-770.
[5] Evans M S, Chaurette J P, Adams Jr S T, et al. A synthetic luciferin improves bioluminescence imaging in live mice[J]. Nature methods, 2014, 11(4): 393-395.
CycLuc1是一种合成的、具有血脑屏障通透性的荧光素酶底物,最大发射波长λmax=604nm[1]。CycLuc1可用于体内荧光成像分析以及突变荧光素酶的体外表征研究[2]。
CycLuc1以5-25mg/kg的剂量已被用于在无胸腺裸鼠中监测颅内胶质母细胞瘤(GBM)异种移植肿瘤的生长[3]。在8-10周龄的雄性C57BL/6小鼠中,腹腔注射15mg/kg CycLuc1显著增强了穹窿下器官(SFO)或下丘脑室旁核(PVN)基因表达的体内生物发光成像效果[4]。在无特定病原体的BALB/c、FVB/N、C57BL/6和表达荧光素酶的转基因小鼠(FVB-Tg(CAG-luc,-GFP)L2G85Chco/FathJ)中静脉注射CycLuc1(5mmol/L)后,CycLuc1信号在4-5分钟达到峰值,随后产生持续超过60分钟的稳定信号[5]。
活体小鼠基于CycLuc1的生物发光成像实验方案:
1.制备CycLuc1溶液:
在pH7.4的PBS缓冲液中制备50μmol/L-5mmol/L的CycLuc1工作溶液。配置完成后,使用0.22μm过滤膜进行过滤杀菌。
2.小鼠饲养:
实验使用无特定病原体的BALB/c、FVB/N、C57BL/6小鼠及荧光素酶转基因小鼠(FVB-Tg(CAG-luc,-GFP)L2G85Chco/FathJ),所有小鼠均自由摄食饮水。
3.肿瘤细胞接种:
皮下接种采用1×106个表达荧光素酶的CMT-64或DB7细胞(悬浮于无血清RPMI培养基),肿瘤经1-2周生长期后开始成像。建立4T1肿瘤模型时,将细胞与Matrigel按1:1体积比混合(5×105个细胞与50μl无血清DMEM培养基及50μl Matrigel),接种于小鼠左侧或右侧第二/第四乳腺脂肪垫。接种8天后进行腹腔注射。注射100μl D-荧光素溶液或50μmol/L至5mmol/L浓度范围的CycLuc1后10分钟开始成像。
4.生物发光成像:
成像前使用异氟烷麻醉(2%浓度,1L/min氧气流量),通过IVIS Lumina系统采集图像。成像方案为:30分钟内每2分钟采集一次图像(每次曝光10秒),并在注射后1小时和2小时各采集一次(曝光10秒)。使用Living Image软件分析图像,在每个细胞团周围划定感兴趣区域(ROI)测量总光子数,所有图像保持相同ROI尺寸。
Reference:
[1] Evans M S, Chaurette J P, Adams Jr S T, et al. A synthetic luciferin improves bioluminescence imaging in live mice[J]. Nature methods, 2014, 11(4): 393-395.
Cas No. | 1247879-16-8 | SDF | |
Canonical SMILES | O=C([C@@H]1N=C(C2=NC3=CC4=C(NCC4)C=C3S2)SC1)O | ||
分子式 | C13H11N3O2S2 | 分子量 | 305.38 |
溶解度 | DMSO : ≥ 83.33 mg/mL (272.87 mM) | 储存条件 | Store at -20°C,protect from light |
General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限:-80°C 储存时,请在 6 个月内使用,-20°C 储存时,请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度,请将管子加热至37℃,然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
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Shipping Condition | 评估样品解决方案:配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸:配备RT,或根据请求配备蓝冰。 |
制备储备液 | |||
![]() |
1 mg | 5 mg | 10 mg |
1 mM | 3.2746 mL | 16.373 mL | 32.7461 mL |
5 mM | 0.6549 mL | 3.2746 mL | 6.5492 mL |
10 mM | 0.3275 mL | 1.6373 mL | 3.2746 mL |
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量) | ||||||||||
给药剂量 | mg/kg | 动物平均体重 | g | 每只动物给药体积 | ul | 动物数量 | 只 | |||
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶于水的药物;不同批次药物配方比例不同,请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方) | ||||||||||
% DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
计算重置 |
计算结果:
工作液浓度: mg/ml;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL,
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL saline,混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的;
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
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