Peroxidase
(Synonyms: 过氧化物酶（辣根）) 目录号 : GC61846
Peroxidase是生物体内广泛存在的一种氧化还原酶，通常以过氧化氢（H₂O₂）作为氧化剂。它能够催化多种芳香化合物的氧化反应，因此广泛应用于在医疗诊断、食品加工、化学工业等多种领域。
Cas No.:9003-99-0
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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Peroxidase is a widely distributed oxidoreductase in living organisms, typically utilizing hydrogen peroxide (H₂O₂) as an oxidizing agent. It catalyzes the oxidation of various aromatic compounds and is therefore broadly applied in medical diagnostics, food processing, and the chemical industry[1,2].
Reference:
[1] de Oliveira F K, Santos L O, Buffon J G, Mechanism of action, sources, and application of peroxidases, Food Res Int[J]. 2021, 143: 110266.
[2] O'Brien P J, Peroxidases, Chem Biol Interact[J]. 2000, 129: 113-139.
Peroxidase是生物体内广泛存在的一种氧化还原酶，通常以过氧化氢（H₂O₂）作为氧化剂。它能够催化多种芳香化合物的氧化反应，因此广泛应用于在医疗诊断、食品加工、化学工业等多种领域[1,2]。
用过氧化物酶测定牛奶中残留过氧化氢的方法过氧化物酶[1]：
1.以1mg/mL的浓度溶于蒸馏水中。
2. 调整牛奶样品至室温。取10mL牛奶样品（或其稀释物），用0.1盐酸将pH调至4.5。如果样品被稀释，用0.01N HCI调整pH值。
3. 在样品中加入2mL 0.01M醋酸缓冲液（pH为4.5）。用蒸馏水将混合物稀释至20mL。
4. 用滤纸过滤样品，去除凝乳。或者，将样品在3400xg下离心10min以去除凝乳。
5. 每个样品滤液准备空白：取滤液5mL，加入蒸馏水1mL，0.1mL 1%邻二苯胺溶液。
6. 在另一管中加入滤液5mL、过氧化物酶溶液1mL、0.1mL 1%邻二苯胺的甲醇溶液。
7. 反应管室温（23-26℃）孵育10min。
8. 每管加入0.2mL 4N HCI终止反应，稳定颜色。
9. 再孵育5min后，在400nm波长处测量每个管的光密度。
10. 用已知浓度的过氧化氢标准溶液（1、2、3、4、5ug/mL）制备标准曲线，比较光密度和过氧化氢浓度。
使用过氧化物酶测定转化酶（SUC）活性的方案[2]:
1.根据试剂盒说明，在PBS中准备30mM蔗糖超纯溶液，100uM Amplex®Red试剂，0.2 2U/ml过氧化物酶和2U/ml葡萄糖氧化酶的工作溶液。此溶液应在使用前准备好，并避光。
2. 在37°C的PBS（pH 6.5）中，将细胞在AP（顶端）和BL（基底外侧）室中预孵育60min，以去除可能干扰反应的葡萄糖。预孵育后，用PBS洗涤细胞两次。
3. 预孵育结束时，在AP室中加入1mL反应缓冲液（30mM蔗糖在PBS中，pH 6.5）。在BL室中加入1mL PBS（pH 7.0）。控制可以运行使用30mM甘露醇代替蔗糖。
4. 在不同的时间间隔从AP室收集50ul，并转移到96孔板，黑色平底。由于酶活性在细胞分化过程中发生变化，因此可能有必要使用不同的时间点进行初步测定，以符合标准曲线的线性。
5. 加入50ul的工作溶液，与50ul的样品和标准品在96孔板中反应，室温下避光反应30min。在TECAN微孔板读卡器中读取荧光，调节为530nm激发，590nm发射，参照标准曲线进行空白相减后转化为浓度。
本协议仅提供了一个指南，应根据您的具体需要进行修改。
Reference:
[1] Gilliland S E, Enzymatic Determination of Residual Hydrogen Peroxide in Milk1, 2, Journal of Dairy Science[J]. 1969, 52: 321-324.
[2] Ferruzza S, Rossi C, Scarino M L, et al., A protocol for in situ enzyme assays to assess the differentiation of human intestinal Caco-2 cells, Toxicology in Vitro[J]. 2012, 26: 1247-1251.
| Cas No. | 9003-99-0 | SDF | |
| 别名 | 过氧化物酶（辣根） | ||
| Canonical SMILES | [Peroxidase] | ||
| 分子式 | 分子量 | ||
| 溶解度 | 0.1 M phosphate buffer: soluble 10 mg/mL, clear, orange to red (pH 6.0) | 储存条件 | Store at -20°C |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
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| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
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- Biological Activity: 310u/mg solid
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- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet