Lipo3000 Transfection Reagent
目录号 : GK20006GMax™ Liposome3000 转染试剂含有脂质体纳米粒子技术，可以提供出色的转染性能，并改善相关应用的结果和可重复性。
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
- Mol Cell Biochem 476.10 (2021): 3757-3769.PMID:34097192
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1.细胞准备
贴壁细胞：建议在转染前一天进行铺板，使用不含抗生素的培养基接种细胞，使之在第二天能够达到70-90%的汇合度。
悬浮细胞：建议在转染当日细胞密度达到2-4×106 /ml。
2. Lipo3000 Transfection Reagent转染方案
3. siRNA 的转染
将siRNA转染到细胞中时，请遵循上述DNA转染方案，但稀释siRNA时无需添加P3000（步骤3）。
4. 不同细胞培养板转染的培养基、核酸及Lipo3000用量推荐表
注意事项：
1、转染时细胞应处于良好生长状态，建议转染时细胞密度达到70-80%。
2、对于大多数细胞来说，转染时较高的细胞密度可以得到高的转染效率和表达水平，并且减少一定的细胞毒性。
3、对于贴壁细胞，建议在铺板12-24h后进行转染，此时细胞贴壁情况良好。
4、每次实验时的细胞状态、DNA或siRNA均有一定程度的区别，建议通过预实验摸索最佳条件，尤其是转染试剂的用量，同时设置阳性对照和阴性对照。
5、转染时应注意脂质体和质粒的用量比例，脂质体过量会对细胞产生较大毒性，从而导致实验失败。为达到最高的转染效率和最低细胞毒性，可以对DNA和Lipo3000的比例以及细胞密度进行优化，一般在1:0.5~1:5的范围内优化DNA(μg)和Lipo3000 (μl)的比例。
6、转染所需的DNA或RNA需是高纯度、高质量的，可获得更高的转染效率。用于转染的质粒浓度在0.5-5μg/μL为宜，无内毒素、蛋白质、RNA或其他化学物质的污染。
7、培养基中的血清会影响脂质体复合物的形成，建议使用不含血清的Opti-MEM减血清7、培养基配置转染体系，细胞培养基中的血清不会影响转染效率。
8、为提高转染效率，建议在转染前铺板时使用不含抗生素的培养基接种细胞，并在转染前2h将培养基更换为低血清（2%）、无抗生素的培养基对细胞进行饥饿处理，转染后4-6h更换为完全培养基，能够极大提高转染效率。
9、如果需要筛选稳定转染的细胞株，建议在转染24h后将细胞按照1:10或更高的比例接种到新鲜培养基中，第二天更换为选择性培养基进行筛选。建议根据不同基因载体中所含有的抗性标志选用相应的药物，常用的真核表达基因载体的标志物有潮霉素和新霉素等。
GMax™ Liposome3000 Transfection Reagent contains liposome nanoparticle technology, which can provide excellent transfection performance and improve the results and reproducibility of related applications. This reagent has excellent transfection efficiency and can improve cell activity, and is widely used in difficult to transfect and common cell types (such as HEK293 and Hela cells). In the process of successfully transfecting a wide range of cell types related to biological research, this reagent can:
• Provides excellent performance-our reagents that achieve the highest transfection efficiency for cell types that are difficult to transfect (the cell types that can be efficiently transfected include: fibroblasts (3T3, COS-7), myoblasts (C2C12 , L6 CRL-1458), liver cells (HepG2, HuH7), red leukemia cells (K562), breast cancer (MCF7, Hs578T), prostate cancer (LNCap), lung cancer cells (A549, NCI-H460), osteosarcoma cells ( U-2 OS, Saos-2), colon cancer cells (Caco2, SW480), pancreatic cancer cells (PANC-1) Skin melanoma cells(SK-MEL-28)
• Improve cell activity-gentle on cells and very low toxicity (this liposome dosage can maintain a high transfection efficiency in a wide dynamic range, and can be optimized easily and quickly as needed. For related applications where damage is minimized, the use of low-toxic liposomes is recommended)
GMax™ Liposome 3000 转染试剂采用了脂质体纳米技术，能够提供出色的转染性能，并改善相关应用的结果和可重复性。该试剂具有优异的转染效率，可以提高细胞活性，在难以转染和常见细胞类型（如HEK293和Hela细胞）中得到广泛应用。在成功地转染与生物研究相关的各种细胞类型过程中，该试剂可以实现以下功能：
• 提供卓越表现 - 我们的试剂对于难以转染的细胞类型达到最高的转染效率（可以有效转染包括成纤维细胞（3T3、COS-7）、肌母细胞（C2C12、L6 CRL-1458）、肝脏细胞（HepG2、HuH7）、红白血病细胞（K562）、乳腺癌(MCF7, Hs578T)、前列腺癌(LNCap)、肺癌(A549, NCI-H460)、骨肉瘤(U-2 OS, Saos-2)、结直肠癌(Caco2, SW480)、胰腺癌(PANC-1)，皮肤黑素瘤(SK-MEL-28)等细胞类型）。
• 提高细胞活性 - 对细胞温和，毒性极低（该脂质体剂量可以在广泛的动态范围内保持高转染效率，并可根据需要轻松快速地进行优化。对于最小化损伤的相关应用，建议使用低毒性脂质体）。
| Components | 0.25 mL | 0.75 mL |
| Lipo3000 Transfection Reagent | 0.25 mL | 0.75 mL |
| P-3000 Reagent | 0.25 mL | 0.75 mL |
| Store at 4°C. Do not freeze. | ||