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Lipo2000 Transfection Reagent

目录号 : GK20005

GMax™ Liposome2000 转染试剂是一种专有配方,可用于将核酸转染到各种真核细胞中。

Lipo2000 Transfection Reagent Chemical Structure

规格 价格 库存 购买数量
0.75mL
¥2,000.00
现货
1.5mL
¥3,600.00
现货

电话:400-920-5774 Email: sales@glpbio.cn

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Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.

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实验参考方法

1.细胞准备
贴壁细胞:建议在转染前一天进行铺板,使用不含抗生素的培养基接种细胞,使之在第二天能够达到70-90%的汇合度。
悬浮细胞:建议在转染当日细胞密度达到2-4×106 /ml。
2. Lipo2000 Transfection Reagent转染方案

GK20005

3.质粒DNA和siRNA的共转染Lipo2000试剂适用于同时转染质粒DNA和siRNA,每1μg DNA添加30pmol (~0.6μg) siRNA。
4.mRNA转染Lipo2000试剂适用于转染mRNA,以24孔板为例,每孔添加0.5–1μg mRNA。
5. 不同细胞培养板转染的培养基、核酸及Lipo2000用量推荐表

GK20005

注意事项:
1、每次实验时的细胞状态、DNA或siRNA均有一定程度的区别,建议通过预实验摸索最佳条件,尤其是转染试剂的用量,同时设置阳性对照和阴性对照。
2、转染时应注意脂质体和质粒的用量比例,脂质体过量会对细胞产生较大毒性,从而导致实验失败。为达到最高的转染效率和最低细胞毒性,可以对DNA和Lipo2000的比例以及细胞密度进行优化,一般在1:0.5~1:5的范围内优化DNA(μg)和Lipo2000(μl)的比例。
细胞状态对转染效果的影响较大,转染时细胞应处于良好生长状态,建议转染时细胞3、密度达到70-80%。
4、对于贴壁细胞,建议在铺板12-24h后进行转染,此时细胞贴壁情况良好。
5、为提高转染效率,建议在转染前铺板时使用不含抗生素的培养基接种细胞,并在转染前2h将培养基更换为低血清(2%)、无抗生素的培养基对细胞进行饥饿处理,转染后4-6h更换为完全培养基,能够极大提高转染效率。
6、转染所需的DNA或RNA需是高纯度、高质量的,可获得更高的转染效率。用于转染的质粒浓度在0.5-5μg/μL为宜,无内毒素、蛋白质、RNA或其他化学物质的污染。
7、培养基中的血清会影响脂质体复合物的形成,建议使用不含血清的Opti-MEM减血清培养基配置转染体系,细胞培养基中的血清不会影响转染效率。
如果需要筛选稳定转染的细胞株,建议在转染24h后将细胞按照1:10或更高的比例接种到新鲜培养基中,第二天更换为选择性培养基进行筛选。建议根据不同基因载体中所含有的抗性标志选用相应的药物,常用的真核表达基因载体的标志物有潮霉素和新霉素等。

产品描述

GMax™ Liposome2000 Transfection Reagent is a proprietary formulation for transfecting nucleic acids into a wide range of eukaryotic cells. DNA-GMax™ Liposome2000 complexes must be made in serum-free medium such as Opti-MEM® Reduced Serum Medium and can be added directly to cells in culture medium, in the presence or absence of serum/antibiotic. It is not necessary to remove complexes or change/add medium after transfection. The amount of GMax™ Liposome2000 Reagent required for successful transfection varies depending on the cell type and passage number. Start any new transfection by testing the recommended four concentrations of GMax™ Liposome2000 Reagent to determine an optimum amount.

GMax™ Liposome2000 转染试剂是一种专有配方,可将核酸转染到各种真核细胞中。DNA-GMax™ Liposome2000 复合物必须在无血清培养基(如 Opti-MEM® Reduced Serum Medium)中制备,并可以直接加入含或不含血清/抗生素的培养基中的细胞。转染后无需去除复合物或更换/添加培养基。成功转染所需的 GMax™ Liposome2000 试剂量因细胞类型和通行证号而异。通过测试推荐的四个浓度来确定最佳用量开始任何新的转染实验。

产品组成

Components 0.75 mL 1.5 mL
Lipo2000 Transfection Reagent 0.75 mL 1.5 mL
Store at 4°C. Do not freeze.