8pyDTZ
目录号 : GC393348pyDTZ是一种吡啶基二苯基特拉嗪（DTZ）类似物，专为生物发光成像而设计，特别针对LumiLuc荧光素酶系统进行了优化。
Cas No.:2351898-91-2
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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8pyDTZ is a pyridyl diphenylterazine (DTZ) analog designed for bioluminescent imaging, specifically optimized for use with the LumiLuc luciferase system. In the presence of pyridyl substrates 8pyDTZ, LumiLuc generates highly bright yellow bioluminescence. 8pyDTZ offers enhanced water solubility and red-shifted emission, making it suitable for in vivo imaging applications[1]. 8pyDTZ has about 13 times better aqueous solubility and bioavailability than DTZ. The emission from 8-pyDTZ/LumiLuc was about 5 times brighter than 8-pyDTZ/teLuc[2].
In vitro, the 8pyDTZ (30µM) can been used to quantify biomarkers such as human serum albumin (HSA) in serum samples and α-amylase in saliva samples by incubating the analyte of interest for 30min at 25℃[3].
In vivo, 8pyDTZ (0.2μmol/mouse) in 100μL normal saline is administrated into luciferase expressing HeLa cells xenograft mouse model via intravenous delivery to track tumor growth with high sensitivity and good tissue penetration ability[1].
References:
[1] Yeh H W, Xiong Y, Wu T C, et al. ATP-Independent Bioluminescent Reporter Variants To Improve in Vivo Imaging. ACS Chem Biol. 2019 May 17;14(5):959-965.
[2] Syed A J, Anderson J C. Applications of bioluminescence in biotechnology and beyond. Chem Soc Rev. 2021 May 7;50(9):5668-5705.
[3] Guo Z, Parakra R D, Xiong Y, et al. Engineering and exploiting synthetic allostery of NanoLuc luciferase. Nat Commun. 2022 Feb 10;13(1):789.
8pyDTZ是一种吡啶基二苯基特拉嗪（DTZ）类似物，专为生物发光成像而设计，特别针对LumiLuc荧光素酶系统进行了优化。在吡啶基底物8pyDTZ的存在下，LumiLuc产生高度明亮的黄色生物发光。8pyDTZ提供增强的水溶性和红移发射，使其适合体内成像应用[1]。8pyDTZ的水溶性和生物利用度是DTZ的13倍。8-pyDTZ/LumiLuc的辐射亮度约为8-pyDTZ/teLuc的5倍[2]。
在体外，8pyDTZ（30µM）可用于定量血清样品中的人血清白蛋白（HSA）和唾液样品中的α-淀粉酶等生物标志物，在25℃下孵育30min[3]。
在体内，将100μL生理盐水中的8pyDTZ （0.2μmol/只）静脉给药到表达荧光素酶的HeLa细胞异种移植小鼠模型中，以高灵敏度和良好的组织穿透能力跟踪肿瘤生长[1]。
使用8pyDTZ在HEK 293T细胞中评估其生物发光性能：
1. 在含有10%胎牛血清（FBS）的DMEM培养基中培养HEK 293T细胞，置于37°C、5% CO₂的培养箱中。
2. 确保细胞健康且汇合度达到70-80%，以便进行转染。
3. 使用基于脂质体的转染方法，将LumiLuc荧光素酶表达质粒瞬时转染到细胞中。
4. 转染后24-48小时，检测细胞表达LumiLuc荧光素酶的情况。
5. 将8pyDTZ溶解于乙醇中，配制成10mM的储备液。
6. 配置含有1mM CDTA、0.5% Tergitol NP-40、0.05% Antifoam 204、150mM KCl、100mM MES（pH 6.0）、1mM DTT和35mM硫脲的实验缓冲液。
7. 将8pyDTZ储备液稀释于实验缓冲液中，使最终浓度为20µM。
8. 将转染后的细胞以每孔5,000个细胞的密度接种到96孔板中。
9. 在培养箱中让细胞贴壁并恢复2-4小时。
10. 向含有转染细胞的每个孔中加入50µL含有8pyDTZ（20µM）的溶液。
11. 在37°C下孵育细胞10分钟。
12. 孵育结束后，立即使用生物发光板式读数器进行生物发光成像，曝光时间为2s。
13. 使用600-700nm带通滤波器捕获远红光发射。
此协议仅提供一个指导方案，可根据具体需求进行调整。
References:
[1] Yeh H W, Xiong Y, Wu T C, et al. ATP-Independent Bioluminescent Reporter Variants To Improve in Vivo Imaging. ACS Chem Biol. 2019 May 17;14(5):959-965.
| Cas No. | 2351898-91-2 | SDF | |
| Canonical SMILES | O=C1C(CC2=CC=CC=C2)=NC3=C(C4=CC=NC=C4)NC(C5=CC=CC=C5)=CN31 | ||
| 分子式 | C24H18N4O | 分子量 | 378.43 |
| 溶解度 | DMSO: 12.5 mg/mL (33.03 mM; DMSO can inactivate 8pyDTZ's activity); EtOH+HCl: 2 mg/mL (5.28 mM; ultrasonic and adjust pH to 2 with 1M HCl; DMSO can inactivate 8pyDTZ's activity); Water: < 0.1 mg/mL (insoluble; DMSO can inactivate 8pyDTZ's activity) | 储存条件 | Store at -20°C,unstable in solution, ready to use. |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
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| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 2.6425 mL | 13.2125 mL | 26.425 mL |
| 5 mM | 0.5285 mL | 2.6425 mL | 5.285 mL |
| 10 mM | 0.2642 mL | 1.3212 mL | 2.6425 mL |
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
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