5-TAMRA-SE (5-TAMRA-NHS ester)
(Synonyms: 5-羧基四甲基罗丹明琥珀酰亚胺酯; 5-TAMRA-NHS ester; 5-Carboxytetramethylrhodamine succinimidyl ester) 目录号 : GC30099
5-TAMRA-SE (5-TAMRA-NHS ester)(5-羧基四甲基罗丹明琥珀酰亚胺酯)是一种明亮的橙红色荧光染料,最大激发/发射波长约为555/580nm。
Cas No.:150810-68-7
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
5-TAMRA-SE (5-TAMRA-NHS ester) (5-carboxytetramethylrhodamine succinimidyl ester) is a bright orange-red fluorescent dye with maximum excitation/emission wavelengths of approximately 555/580nm[1]. The NHS ester group of 5-TAMRA-SE can react specifically with primary amine groups and is widely used to label biomolecules such as proteins, peptides, and antibodies under weak alkaline conditions[2, 3]. 5-TAMRA-SE has high fluorescence intensity and good photostability, making it suitable for applications in fluorescence microscopy and flow cytometry[4, 5]. 5-TAMRA-SE is a cell membrane permeable dye that can enter the bacterial cytoplasm and label metabolically active living bacteria[6].
References:
[1] Karabadzhak A G, An M, Yao L, et al. pHLIP-FIRE, a cell insertion-triggered fluorescent probe for imaging tumors demonstrates targeted cargo delivery in vivo[J]. ACS chemical biology, 2014, 9(11): 2545-2553.
[2] Brunner A, Minamitake Y, Göpferich A. Labelling peptides with fluorescent probes for incorporation into degradable polymers[J]. European journal of pharmaceutics and biopharmaceutics, 1998, 45(3): 265-273.
[3] Patil U S, Qu H, Caruntu D, et al. Labeling primary amine groups in peptides and proteins with N-hydroxysuccinimidyl ester modified Fe3O4@ SiO2 nanoparticles containing cleavable disulfide-bond linkers[J]. Bioconjugate chemistry, 2013, 24(9): 1562-1569.
[4] Archipowa N, Wittmann L, Köckenberger J, et al. Characterization of fluorescent dyes frequently used for bioimaging: Photophysics and photocatalytical reactions with proteins[J]. The Journal of Physical Chemistry B, 2023, 127(44): 9532-9542.
[5] Zeng Q H, Zhang X W, Xu K P, et al. Application of fluorescently labeled tracer technique for detection of natural active macromolecules in Chinese medicine[J]. Drug Metabolism Reviews, 2014, 46(1): 57-71.
[6] Whelan M V X, Ardill L, Koide K, et al. Acquisition of fluoroquinolone resistance leads to increased biofilm formation and pathogenicity in Campylobacter jejuni[J]. Scientific Reports, 2019, 9(1): 18216.
5-TAMRA-SE (5-TAMRA-NHS ester)(5-羧基四甲基罗丹明琥珀酰亚胺酯)是一种明亮的橙红色荧光染料,最大激发/发射波长约为555/580nm[1]。5-TAMRA-SE的NHS酯基团能够特异性地与伯胺基团反应,在弱碱性条件下广泛用于标记蛋白质、多肽和抗体等生物分子[2, 3]。5-TAMRA-SE荧光强度高、光稳定性好,适用于荧光显微镜、流式细胞术应用[4, 5]。5-TAMRA-SE是一种细胞膜渗透性染料,可进入细菌细胞质,标记代谢活跃的活细菌[6]。
本方案仅提供一个指导,请根据您的具体需要进行修改。
1. 溶液制备
(1)储存液:用DMSO溶解5-TAMRA-NHS ester,配置浓度为10mg/mL的储存液。
注意:未使用的储存液分装后在-20℃或-80°C避光保存,避免反复冻融。
(2)工作液:用实验缓冲液稀释储存液,以达到所需的工作浓度。
注意:请根据实际情况调整工作液浓度,现用现配。
1. 使用5-TAMRA-NHS ester标记抗体
市场上买到的抗体如果含有其它蛋白(例如serum albumin或gelatin等)或带氨基的缓冲液会影响标记,在标记前需纯化。
(1)计算标记抗体的总量。
(2)用DMSO配置5-TAMRA-NHS ester溶液,浓度为10mg/mL。计算所需体积以得到想要的5-TAMRA-NHS ester和抗体的比值(例如10:1),然后慢慢将其加入到抗体溶液中,同时在暗处常温缓慢搅拌45min。
(3)用1L 0.15M NaCl溶液常温避光透析4h除去未标记上的5-TAMRA-NHS ester。在4°C避光再次透析过夜。
(4)用1L 0.01M PBS/0.01%叠氮化钠溶液常温避光透析4h,在4°C避光再次透析过夜。
(5)用0.22μm注射器过滤头过滤抗体溶液。测量标记后的蛋白浓度。
(6)产品冷冻干燥成粉末或在0.01M PBS/0.01%叠氮化钠溶液中,-20℃避光储存。
注意:本方案为使用5-TAMRA-NHS ester进行蛋白质标记实验提供了指导。可以根据其他文献和具体实验要求进行调整。操作应在无菌环境中进行,防止污染物干扰反应。避免直接接触反应试剂。
Cas No. | 150810-68-7 | SDF | |
别名 | 5-羧基四甲基罗丹明琥珀酰亚胺酯; 5-TAMRA-NHS ester; 5-Carboxytetramethylrhodamine succinimidyl ester | ||
Canonical SMILES | CN(C1=CC2=[O+]C3=C(C=CC(N(C)C)=C3)C(C4=CC=C(C(ON5C(CCC5=O)=O)=O)C=C4C([O-])=O)=C2C=C1)C | ||
分子式 | C29H25N3O7 | 分子量 | 527.52 |
溶解度 | DMSO : 6.35 mg/mL (12.04 mM) | 储存条件 | Store at -20°C, protect from light, stored under nitrogen |
General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限:-80°C 储存时,请在 6 个月内使用,-20°C 储存时,请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度,请将管子加热至37℃,然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
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Shipping Condition | 评估样品解决方案:配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸:配备RT,或根据请求配备蓝冰。 |
制备储备液 | |||
![]() |
1 mg | 5 mg | 10 mg |
1 mM | 1.8957 mL | 9.4783 mL | 18.9566 mL |
5 mM | 379.1 μL | 1.8957 mL | 3.7913 mL |
10 mM | 189.6 μL | 947.8 μL | 1.8957 mL |
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量) | ||||||||||
给药剂量 | mg/kg | 动物平均体重 | g | 每只动物给药体积 | ul | 动物数量 | 只 | |||
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶于水的药物;不同批次药物配方比例不同,请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方) | ||||||||||
% DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
计算重置 |
计算结果:
工作液浓度: mg/ml;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL,
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL saline,混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的;
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
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