Methoxy-X04
目录号 : GC10894
Methoxy-X04是一种淀粉样蛋白-β（aβ）的脑透性荧光探针，用于检测和量化斑块、缠结和脑血管淀粉样蛋白。它对原纤维β-片沉积显示出高的体外结合亲和力（Ki =26.8 nM）。
Cas No.:863918-78-9
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
Quality Control & SDS
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- Purity: >98.00%
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本方案仅提供一个指导，请根据您的具体需要进行修改。
1. 体外成像实验[1]
(1) 固定与切片准备：老鼠被用冷PBS和4%的甲醛固定液灌注，随后在4%的甲醛固定液中孵育过夜。切片用振动刀切成40微米的厚度。
(2) 染色过程：切片先用PBS洗涤，然后在含有10 mM methoxy-X04的50% DMSO/50% NaCl (0.9%)溶液中，pH值为12，孵育10分钟，再用PBS洗涤两次。
(3) 荧光检测：使用激光扫描共聚焦显微镜成像。Methoxy-X04的激发峰是750nm，发射波长范围是460-500 nm。
2. 体内成像实验[2]
(1) 溶液配制：将methoxy-X04溶解于含有10%二甲亚砜（DMSO）、45%丙二醇和45%磷酸钠缓冲盐水（0.9% NaCl溶于100 mM磷酸盐缓冲液，pH 7.4）的溶液中，制备5 mg/ml methoxy-X04溶液。
(2) 体内给药：灌注前24小时，对小鼠称重，并以10 mg/kg体重的剂量向每只小鼠给予腹腔内注射methoxy-X04。
(3) 制备脑切片：向小鼠腹膜内注射90 mg/kg体重剂量的戊巴比妥钠，处死小鼠取脑，制备脑切片。将每个切片置于含有足够冷冻保护剂溶液的24孔培养板的孔中，以防止切片干燥。
(4) 荧光检测：用荧光紫外（UV）滤光片（激发波长340 - 380 nm）在荧光显微镜下检查切片，以鉴别含有methoxy-X04标记的Aβ斑块的区域。
注意事项：
(1)确保在进行所有实验操作过程中遵循实验室安全规范，特别是在处理化学试剂和进行动物实验时。
(2)调整荧光显微镜的设置以获得最佳成像结果。
(3)实验前后清洁和消毒实验区域和设备，以防交叉污染。
(4)实验数据应详细记录，包括动物的体重、药物剂量
Methoxy-X04 is a fluorescent derivative of Congo Red and Thioflavin T, lacking acidic groups, with a smaller molecular weight and increased lipophilicity. Methoxy-X04 can cross the blood-brain barrier and selectively binds to the beta-sheet structures in dense core amyloid-beta (Aβ) plaques. Methoxy-X04 retains its in vitro binding affinity for amyloid-beta (Aβ) protofibrils, Ki=26.8nM. In vitro, Methoxy-X04 can stain plaques, tangles, and cerebral amyloid angiopathy in post-mortem Alzheimer's disease (AD) brain sections, demonstrating good specificity. In vivo, Methoxy-X04 can be used for imaging Aβ amyloid plaques in the brains of living APP/PS1 mice [1,2].
References:
[1] Bisht K, et al. Correlative Light and Electron Microscopy to Study Microglial Interactions with β-Amyloid Plaques. J Vis Exp. 2016 Jun 1;(112):54060.
[2] Klunk WE, et al. Imaging Abeta plaques in living transgenic mice with multiphoton microscopy and methoxy-X04, a systemically administered Congo red derivative. J Neuropathol Exp Neurol. 2002 Sep;61(9):797-805.
Methoxy-X04是一种具有荧光性的刚果红和柯胺G的衍生物，不含酸性基团，分子量更小且亲脂性更强。Methoxy-X04可以穿过血脑屏障，选择性地结合在致密中心淀粉样蛋白Aβ斑块中的β-折叠层。Methoxy-X04 保留对淀粉样蛋白-β（aβ）原纤维的体外结合亲和力 ，Ki= 26.8 nM。Methoxy-X04在体外可对阿兹海默症 (AD) 大脑死后切片中的斑块、缠结和脑血管淀粉样蛋白进行染色，具有良好的特异性。Methoxy-X04在体内可用于APP/PS1小鼠活体内的大脑Aβ淀粉样斑块成像[1,2]。
| Cas No. | 863918-78-9 | SDF | |
| 化学名 | 4,4'-((1E,1'E)-(2-methoxy-1,4-phenylene)bis(ethene-2,1-diyl))diphenol | ||
| Canonical SMILES | COC1=C(C=CC(/C([H])=C([H])/C2=CC=C(O)C=C2)=C1)/C([H])=C([H])/C3=CC=C(O)C=C3 | ||
| 分子式 | C23H20O3 | 分子量 | 344.4 |
| 溶解度 | 5 mg/ml in ethanol; 30 mg/ml in DMSO and DMF | 储存条件 | Store at -20°C,protect from light |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
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| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 2.9036 mL | 14.518 mL | 29.036 mL |
| 5 mM | 0.5807 mL | 2.9036 mL | 5.8072 mL |
| 10 mM | 0.2904 mL | 1.4518 mL | 2.9036 mL |
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。