TSQ
目录号 : GC66458
TSQ是一种能显示细胞内锌蛋白的荧光探针,最大激发/发射波长在360nm/470nm附近。
Cas No.:109628-27-5
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
TSQ is a fluorescent probe that images zinc proteins in cells, with maximum excitation/emission wavelengths near 360nm/470nm[1]. TSQ was successfully employed in pinpoint a pool of free Zn2+ in the brain[2]. TSQ functions as an effective tool for evaluation of Zn2+ within artificial membranes and sperm cells while demonstrating strong binding to lipid bilayers[3]. TSQ can be used to detect free zinc in breast cells (MCF7, MDA-MB-231, T47D, and MCF10A cells) and to determine the distribution and uptake of zinc[4]. TSQ can be used for histochemical staining of tissue sections, which can show the location of zinc-containing (glutamatergic) nerve endings in neurofibroma[5].
References:
[1] Meeusen J W, Tomasiewicz H, Nowakowski A, et al. TSQ (6-methoxy-8-p-toluenesulfonamido-quinoline), a common fluorescent sensor for cellular zinc, images zinc proteins[J]. Inorganic chemistry, 2011, 50(16): 7563-7573.
[2] Frederickson C J, Kasarskis E J, Ringo D, et al. A quinoline fluorescence method for visualizing and assaying the histochemically reactive zinc (bouton zinc) in the brain[J]. Journal of neuroscience methods, 1987, 20(2): 91-103.
[3] Andrews J C, Nolan J P, Hammerstedt R H, et al. Characterization of N‐(6‐methoxy‐8‐quinolyl)‐p‐toluenesulfonamide for the detection of zinc in living sperm cells[J]. Cytometry: The Journal of the International Society for Analytical Cytology, 1995, 21(2): 153-159.
[4] Hübner C, Keil C, Jürgensen A, et al. Comparison of three low-molecular-weight fluorescent probes for measuring free zinc levels in cultured mammary cells[J]. Nutrients, 2023, 15(8): 1873.
[5] Frederickson C J, Suh S W, Silva D, et al. Importance of zinc in the central nervous system: the zinc-containing neuron[J]. The Journal of nutrition, 2000, 130(5): 1471S-1483S.
TSQ是一种能显示细胞内锌蛋白的荧光探针,最大激发/发射波长在360nm/470nm附近[1]。TSQ已成功应用于脑部游离Zn2+的精确定位[2]。TSQ能有效用于评估人工膜和精子细胞内的Zn2+,表现出与脂质双分子层的强结合特性[3]。TSQ可用于检测乳腺癌细胞(MCF7、MDA-MB-231、T47D和MCF10A细胞)中的游离锌,并测定锌的分布与摄取情况[4]。TSQ可用于组织切片的组织化学染色,能显示神经纤维瘤中含锌(谷氨酸能)神经末梢的定位[5]。
本方案仅提供一个指导,请根据您的具体需求进行修改。
1.染色液的制备
(1)配置储存液:使用DMSO溶解TSQ,配置浓度为1-5mM的储存液。
注意:未使用的储存液分装后在-20℃或-80°C避光保存,避免反复冻融。
(2)配置工作液:用合适的缓冲液(如:无血清培养基或PBS)稀释储存液,配制浓度为0.1-100μmol/L的工作液。
注意:请根据实际情况调整工作液浓度,现用现配。
2.细胞悬浮染色
(1)悬浮细胞:
经4°C,1000g离心3-5分钟,弃去上清液,用PBS清洗两次,每次5分钟。
(2)贴壁细胞:
使用PBS清洗两次,加入胰酶消化细胞,消化完成后经1000g离心3-5min。
(3)加入1mL的TSQ工作溶液重悬细胞,37°C避光孵育30分钟左右。不同细胞最佳孵育时间不同,请根据具体实验需求自行摸索。
(4)孵育结束后,经1000g离心5分钟,去除上清液,加入PBS清洗2-3次,每次5分钟。
(5)用预温的无血清细胞培养基或PBS重悬细胞,通过荧光显微镜或流式细胞术观察。
3.细胞贴壁染色
(1)在无菌盖玻片上培养贴壁细胞。
(2)从培养基中移走盖玻片,吸出过量的培养基,将盖玻片放在潮湿的环境中。
(3)从盖玻片的一角加入100μL的染料工作液,轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。
(4) 37°C避光孵育30分钟。不同细胞最佳孵育时间不同,请根据具体实验需求自行摸索。
(5)孵育结束后吸弃染料工作液,使用预温的培养液清洗盖玻片2-3次。
4.显微镜检测
TSQ的最大激发/发射波长在360nm/470nm附近。
Reference:
[1] Meeusen J W, Tomasiewicz H, Nowakowski A, et al. TSQ (6-methoxy-8-p-toluenesulfonamido-quinoline), a common fluorescent sensor for cellular zinc, images zinc proteins[J]. Inorganic chemistry, 2011, 50(16): 7563-7573.
Cas No. | 109628-27-5 | SDF | Download SDF |
分子式 | C17H16N2O3S | 分子量 | 328.39 |
溶解度 | DMSO : ≥ 100 mg/mL (304.52 mM) | 储存条件 | 4°C, protect from light |
General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限:-80°C 储存时,请在 6 个月内使用,-20°C 储存时,请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度,请将管子加热至37℃,然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
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Shipping Condition | 评估样品解决方案:配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸:配备RT,或根据请求配备蓝冰。 |
制备储备液 | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
1 mM | 3.0452 mL | 15.2258 mL | 30.4516 mL |
5 mM | 0.609 mL | 3.0452 mL | 6.0903 mL |
10 mM | 0.3045 mL | 1.5226 mL | 3.0452 mL |
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量) | ||||||||||
给药剂量 | mg/kg | 动物平均体重 | g | 每只动物给药体积 | ul | 动物数量 | 只 | |||
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶于水的药物;不同批次药物配方比例不同,请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方) | ||||||||||
% DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
计算重置 |
计算结果:
工作液浓度: mg/ml;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL,
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL saline,混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的;
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
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