T4 Polynucleotide Kinase
(Synonyms: T4多聚核苷酸激酶) 目录号 : GC26293T4 Polynucleotide Kinase，简称T4 PNK，中文名称T4多聚核苷酸激酶，是一种多聚核苷酸5'羟基激酶，
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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使用说明：
1. DNA 5'末端标记：
a. 参考如下表格设置反应体系：
| Reagent | Volume |
| 待磷酸化DNA | 1～20pmol(5'末端) |
| Reaction Buffer A(10X) | 2μl |
| [γ-32P or γ-33P]-ATP (3,000Ci/mmol) | 20pmol |
| 补充无核酸酶的去离子水 | 至19μl |
| T4 Polynucleotide Kinase (10U/μl) | 1μl |
b. 按上表设置好反应体系后，轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用Vortex在最低速度轻轻混匀)，随后离心沉淀液体。
c. 37℃孵育30分钟。
d. 加入1μl 0.5M EDTA(pH8.0)混匀，以终止反应。
e. 后续可以使用酚氯仿抽提、乙醇沉淀等方法纯化标记的DNA，也可以使用适当的DNA纯化试剂盒进行纯化。
2. DNA 5'末端磷酸化：
a. 参考如下表格设置反应体系：
| Reagent | Volume |
| 待磷酸化DNA | 1～20pmol(5'末端) |
| Reaction Buffer A (10X) | 2μl |
| 0.1mM ATP | 1μl |
| 补充无核酸酶的去离子水 | 至19μl |
| T4 Polynucleotide Kinase (10U/μl) | 1μl |
b. 按上表设置好反应体系后，轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用Vortex在最低速度轻轻混匀)，随后离心沉淀液体。
c. 37℃孵育30分钟。
d. 加入1μl 0.5M EDTA(pH8.0)混匀，以终止反应。
e. 后续可以使用酚氯仿抽提、乙醇沉淀等方法纯化标记的DNA，也可以使用适当的DNA纯化试剂盒进行纯化。
3. 通过交换反应(exchange reaction)进行DNA 5'末端标记：
a. 参考如下表格设置反应体系：
| Reagent | Volume |
| 待磷酸化DNA | 1～20pmol (5'末端) |
| Reaction Buffer B (10X) | 2μl |
| [γ-32P or γ-33P]-ATP (3,000Ci/mmol) | 40pmol |
| 24% PEG Solution | 4μl |
| 补充无核酸酶的去离子水 | 至19μl |
| T4 Polynucleotide Kinase (10U/μl) | 1μl |
b. 按上表设置好反应体系后，轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用Vortex在最低速度轻轻混匀)，随后离心沉淀液体。
c. 37℃孵育30分钟。
d. 加入1μl 0.5M EDTA(pH8.0)混匀，以终止反应。
e. 后续可以使用酚氯仿抽提、乙醇沉淀等方法纯化标记的DNA，也可以使用适当的DNA纯化试剂盒进行纯化。
4. 其它用途可以参考上述用途或相关文献资料进行。
T4 Polynucleotide Kinase, abbreviated as T4 PNK, is a polynucleotide 5 'hydroxy kinase that catalyzes ATP γ The phosphate group is transferred to the 5 'hydroxyl group of single or double stranded DNA, RNA, oligonucleotides, or single nucleotides with a 3' phosphate group. Other NTPs can also produce the same reaction: 5 '- OH+NTP → 5' - P+NDP.
T4 Polynucleotide Kinase，简称T4 PNK，中文名称T4多聚核苷酸激酶，是一种多聚核苷酸5'羟基激酶，可以催化ATP的γ位磷酸基团向单链或双链DNA、RNA、寡核苷酸或带有3'磷酸基团的单核苷酸的5'羟基转移。其他NTP也可产生相同的反应：5'-OH + NTP → 5'-P + NDP。
| Cas No. | SDF | ||
| 别名 | T4多聚核苷酸激酶 | ||
| 分子式 | 分子量 | ||
| 溶解度 | 储存条件 | -20℃ | |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
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| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。