Streptavidin-FITC
目录号 : GC19886
Streptavidin-FITC与生物素具有高亲和力，Kd值约10−15mol/L。
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
Streptavidin-FITC has a high affinity for biotin, with a Kd value of approximately 10−15 mol/L[1]. Streptavidin-FITC is used to detect biotinylated antibodies, proteins, nucleic acids or other molecules, and is suitable for studies such as immunohistochemistry (IHC), immunocytochemistry (ICC), immunofluorescence (IF) and in situ hybridization (ISH), and can be observed by fluorescence microscopy or flow cytometry[2]. Streptavidin is a 52,800 Dalton tetrameric protein that has an extremely high affinity for biotin. One molecule of streptavidin can bind to four molecules of biotin, and this binding is irreversible[3]. The maximum excitation/emission wavelengths of Streptavidin-FITC are 488/520 nm, respectively[4].
References:
[1] Hu S, Yang H, Cai R, et al. Biotin induced fluorescence enhancement in resonance energy transfer and application for bioassay[J]. Talanta, 2009, 80(2): 454-458.
[2] Gmür R, Lüthi-Schaller H. A combined immunofluorescence and fluorescent in situ hybridization assay for single cell analyses of dental plaque microorganisms[J]. Journal of microbiological methods, 2007, 69(2): 402-405.
[3]Jeney S, Mor F, Koszali R, et al. Monitoring ligand–receptor interactions by photonic force microscopy[J]. Nanotechnology, 2010, 21(25): 255102.
[4]Wu D, Zhou X, Zhang J, et al. A FAPI-conjugated FITC fluorescence probe for targeted cancer imaging[J]. New Journal of Chemistry, 2024, 48(14): 6314-6321.
Streptavidin-FITC与生物素具有高亲和力，Kd值约10−15mol/L[1]。 Streptavidin-FITC用于检测生物素化的抗体、蛋白质、核酸或其他分子，适用于免疫组织化学（IHC），免疫细胞化学（ICC），免疫荧光（IF）和原位杂交（ISH）等研究，可通过荧光显微镜或流式细胞仪进行观察[2]。链霉亲和素（Streptavidin）是一种52,800道尔顿大小的四聚体蛋白，对生物素具有极高的亲和力，一分子链霉亲和素可以结合四分子生物素，且这种结合是不可逆的[3]。Streptavidin-FITC的最大激发光/发射光波长分别为488/520 nm[4]。
本方案仅提供一个指导，请根据您的具体需要进行修改。
1. 溶液配制
（1）储存液：本产品以浓度为0.5mg/ml的溶液形式提供。
注意：请储存在2-8°C，避光保存，避免反复冻融。
（2）工作液：正式实验前，使用抗体稀释液/封闭液以1：20 至1：50的比例稀释。
注意：特定应用的工作浓度请根据实际情况调整或参阅文献自行设置梯度浓度进行摸索，以获得最佳条件。工作液必须现配现用。
2.使用Streptavidin-FITC结合流式细胞仪检测细胞表面凝集素结合[1](来自文献,仅做参考)
（1）细胞处理：将细胞转移至96孔板中，每孔加入1 µg生物素化凝集素处理细胞，孵育1小时。
（2）洗涤细胞：使用PBS清洗细胞三次。
（3）标记：使用Streptavidin-FITC工作液孵育30分钟。
（4）荧光检测：使用FACSCalibur流式细胞仪测量细胞的凝集素结合谱。激发和发射波长分别设置为488 nm和520 nm。
3. 使用Streptavidin-FITC标记细胞步骤[2](来自文献,仅做参考)
（1）细胞处理：用含有1%多聚甲醛，0.1% Tritron X-100的PBS缓冲液在4°C下孵育细胞30分钟。
（2）洗涤细胞：用PBS缓冲液清洗细胞两次。
（3）生物素处理细胞：将细胞与生物素化肽在4°C下孵育1小时。
（4）标记：将细胞与Streptavidin-FITC工作液（10 µg/ml）在4°C下孵育30分钟，然后洗涤两次（重复步骤2）。
（5）PI处理细胞：将细胞浸没于添加1 µg/ml碘化丙啶（PI）的PBS缓冲液中，以便在25 °C下观察细胞。
（6）荧光检测：使用荧光显微镜观察细胞。用于FITC通道的激发和发射波长分别为488和525 nm。
注意：该实验方案为使用Streptavidin-FITC标记细胞和随后的荧光测量提供指导。可以根据其他文献和具体实验要求进行调整。
References:
[1]Thomas M, Pierson M, Uprety T, et al. Comparison of porcine airway and intestinal epithelial cell lines for the susceptibility and expression of pattern recognition receptors upon influenza virus infection[J]. Viruses, 2018, 10(6): 312.
[2] Smith T E, Pond C D, Pierce E, et al. Accessing chemical diversity from the uncultivated symbionts of small marine animals[J]. Nature chemical biology, 2018, 14(2): 179-185.
| Cas No. | SDF | ||
| 分子式 | 分子量 | ||
| 溶解度 | 1:20 to 1:50 dilution with PBS containing 10% normal goat serum. Working dilution for specific application should be determined by individual investigator to obtain the best conditions. | 储存条件 | Store at 2-8°C. protect from light. Do not freeze. |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
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| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
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