ROSGreenTM H202 Probe
(Synonyms: 过氧化氢荧光探针; ROSGreenTM Hydrogen peroxide Probe; ROSGreenTM Hydrogen peroxide sensor; ROSGreenTM H2O2sensor) 目录号 : GC26183过氧化氢 (Hydrogen peroxide,H2O2) 是一种反映氧代谢副产物，用于许多氧化应激相关态的关键调节剂。
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
;)
,-1-7$$$37316672.jpg');)
;)
;)
$$$36806353.jpg');)
;33(7)%EF%BC%9A546-561$$$37156877.jpg');)
;)
;)
;)
%201124-1138.$$$35908550.jpg');)
%20766-780.$$$37100057.jpg');)
%20418-432.$$$36893736.jpg');)
%EF%BC%9A-240-255.$$$35108512.jpg');)
533-545$$$36543525.jpg');)
%201-13.$$$36600053.jpg');)
;)
Quality Control & SDS
- View current batch:
- Purity: >98.00%
- COA (Certificate Of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet
保存与运输方法
保存： -20℃避光干燥保存，至少1年有效。
运输：冰袋运输。
注意事项
1)本品的DMSO 储存液需分装成单次用量后， -20℃避光保存，避免反复冻融。所有工作液现配现用。
2)整个操作过程中注意避光。
3)为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
1、储存液制备
将低温保存的产品从冰箱取出，置于室温回温至少20min。低速离心3-5min。 之后往瓶内加入适量无水DMSO 充分溶解配成2~5mM 储存液(比如，1mg ROSGreen TMH2O2Probe(Mw:~600) 加入333μl DMSO,充分溶解混匀后即得到5mM 储存液)。按照单次用量分装冻存，避免反复冻融，至少3个月稳定。
2、工作液准备
正式实验前，或取粉末按照【储存液制备】用DMSO溶解，或于室温融化一管DMSO储存液。
2.1 对于溶液H2O2测定，按照2~20μM工作液浓度制备2x 工作液，用20mM Hepes缓冲液或其他缓冲液 (pH7.0) 稀释储存液。工作液现配现用。建议使用5μM终 浓度的ROSGreenTMH2O2Probe, 测定溶液体系中H2O2浓度。
2.2 对于细胞H2O2 测定，按照2~20μM 工作液浓度制备1×工作液，用含20mM Hepes缓冲液的HBSS,pH 7.0 或PBS 稀释储存液。工作液现配现用。
3、 上清液H2O2 测定
【以下为溶液H2O2 测定的推荐步骤，仅作参考，请根据具体需求做优化调整。】
3.1于96孔板，加50μl 2×ROSGreenTMH2O2Probe工作液到每个孔 (H2O2标准、空白对照、待测样本)内使总的测定体积为100μl/孔。 【注意：对于384孔板，加25μl样品和25μl 2xROSGreenTMH2O2Probe工作液，使得测定体积为50μl/ 孔。】
3.2室温避光解育反应体系15~60min。
3.3荧光酶标板内监测用荧光增强，Ex/Em=490/525nm。
3.4空白孔(只含有反应缓冲液)的荧光用作对照，其他孔的荧光值需减掉空白对照孔荧光。
4、活细胞H2O2 测定
【ROSGreenTMH2O2Probe能主动扩散进入活细胞，且能反映胞内H2O2微摩尔浓度变化。以下是推荐的活细胞H2O2显微成像检测步骤，仅作参考，可根据具体需 求优化调整。】
4.1按照步骤2.2配制1×ROSGreenTMH2O2Probe 工作液。工作液现配现用。
4.2按照实验要求处理细胞。
4.3用1×ROSGreenTMH2O2Probe 工作液避光孵育细胞5~60min或适合自身需求的时间。用PBS清洗细胞2次。
4.4用荧光酶标板(底部读数模式)监测荧光增强，Ex/Em=490/525nm。或者用荧光显微镜的FITC通道成像检测荧光增强。
染色示例
图1.Costar 黑色96孔培养板内CHO-K1 活细胞用ROSGreenTMH2O2Probe 的染色图。图A: 对照细胞；图B: 用H2O2(100μM) 处理5min后的细胞
过氧化氢 (Hydrogen peroxide,H2O2) 是一种反映氧代谢副产物，用于许多氧化应激相关态的关键调节剂，参与人体大量的生理和病理活动，比如哮喘、动脉粥样 硬化、糖尿病血管病变、神经性衰退疾病和唐氏综合征等，但目前对H2O2生成、积累、运输和功能的分子机制仍了解很少，最大的限制在于缺乏灵敏且特异性H2O2探针，用于活细胞研究。目前能得到的H2O2 反应性探针的缺陷包括1)来自其他ROS 比如过氧亚硝基阴离子(ONOO-)、过氧化基(ROO·)、超氧化物(·O2-) 的背景荧光干扰；2)对外源活化酶的需求；3)水缺乏水溶性或不兼容于水溶体系；4)以及紫外区域的激发光谱特征等。
本ROSGreenTMH2O2Probe正是克服以上缺陷开发的一款过氧化氢(H2O2) 选择性探针。探针本身无荧光，可见光区域内无吸收峰。 一旦接触H2O2, 瞬间激发荧光增加并伴随可见波长吸收带的生成(Ex/Em=490/514nm)。因其二元的吸收/发射荧光反应，此探针具有较大的动力学范围。与相似的ROS 比如O2-,NO, 或 OCl-相比， ROSGreenTMH2O2Probe对H2O2呈现出>100倍(100-fold) 的选择性。
| Cas No. | SDF | ||
| 别名 | 过氧化氢荧光探针; ROSGreenTM Hydrogen peroxide Probe; ROSGreenTM Hydrogen peroxide sensor; ROSGreenTM H2O2sensor | ||
| 分子式 | 分子量 | ||
| 溶解度 | 储存条件 | Desiccate at -20°C , protect from light | |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
||
| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。