PBFI AM
(Synonyms: Potassium-binding Benzofuran Isophthalate Acetoxymethyl ester) 目录号 : GC18477PBFI AM是一种细胞膜渗透性荧光探针，可作为钾离子敏感性染料使用。
Cas No.:124549-23-1
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
PBFI AM, the cell membrane permeable fluorescent probe, acts as the K(+)-sensitive dye [1]. The interaction of buforin IIb with Jurkat cell membranes was studied by measuring intracellular K+ levels using PBFI AM [2]. PBFI AM can be used in flow cytometry analysis to investigate the correlation between cell apoptosis and potassium ion levels[3].
References:
[1] Kasner S E, Ganz M B. Regulation of intracellular potassium in mesangial cells: a fluorescence analysis using the dye, PBFI[J]. American Journal of Physiology-Renal Physiology, 1992, 262(3): F462-F467.
[2] Lee H S, Park C B, Kim J M, et al. Mechanism of anticancer activity of buforin IIb, a histone H2A-derived peptide[J]. Cancer letters, 2008, 271(1): 47-55.
[3] Scoltock A B, Cidlowski J A. Activation of intrinsic and extrinsic pathways in apoptotic signaling during UV-C-induced death of Jurkat cells: the role of caspase inhibition[J]. Experimental cell research, 2004, 297(1): 212-223.
PBFI AM是一种细胞膜渗透性荧光探针，可作为钾离子敏感性染料使用[1]。通过使用PBFI AM检测细胞内钾离子浓度，可研究buforin IIb与Jurkat细胞膜的相互作用机制[2]。PBFI AM可应用于流式细胞分析，用于探究细胞凋亡与钾离子水平之间的关联[3]。
应用 PBFI AM进行细胞内K+含量测定
此方案仅提供了一项指导原则，具体操作应根据您的实际需求进行调整。
1. 试剂准备
（1）取适量的PBFI AM固体，用DMSO溶解，制备高浓度储备溶液（如1mM）。
（2）使用PBS缓冲液将1mM的PBFI AM储备溶液稀释为10μM的PBFI AM工作溶液。PBFI AM工作溶液需现配现用。
2. 细胞样本准备
将1.5×104个细胞接种到96孔培养皿中，并在完全培养基（含10%胎牛血清）中培养过夜。
3. PBFI AM染色
（1）将完全培养基替换为低血清（1%）培养基，并孵育45分钟（37℃，5% CO2）。
（2）除去培养基，用PBS清洗细胞2-3次。
（3）向每孔细胞加入50μl 10μM的PBFI AM。
（4）轻轻摇动培养皿以确保染色溶液均匀分布。
（5）100分钟后，吸弃PBFI AM工作液，使用PBS清洗细胞2-3次。
（6）加入适量的PBS缓冲液使细胞完全浸没。
4. 光学检测
利用在500nm发射波长处检测的344nm和400nm荧光激发比值来分析细胞内的K+含量。
5. 注意事项
（1）PBFI AM 具有光敏性。操作过程中应尽可能避免光照。
（2）染色时间和温度应根据细胞类型和实验要求进行优化。
（3）在实验过程中，应严格控制实验条件，如温度，以确保实验结果的可靠性。
References:
[1] Andersson B, Janson V, Behnam-Motlagh P, et al. Induction of apoptosis by intracellular potassium ion depletion: using the fluorescent dye PBFI in a 96-well plate method in cultured lung cancer cells[J]. Toxicology in vitro, 2006, 20(6): 986-994.
| Cas No. | 124549-23-1 | SDF | |
| 别名 | Potassium-binding Benzofuran Isophthalate Acetoxymethyl ester | ||
| 化学名 | 4,4'-[1,4,10,13-tetraoxa-7,16-diazacyclooctadecane-7,16-diylbis(5-methoxy-6,2-benzofurandiyl)]bis-1,3-benzenedicarboxylic acid, tetrakis[(acetyloxy)methyl] ester | ||
| Canonical SMILES | COC1=CC2=C(OC(C3=C(C(OCOC(C)=O)=O)C=C(C(OCOC(C)=O)=O)C=C3)=C2)C=C1N4CCOCCOCCN(C5=CC(OC(C6=C(C(OCOC(C)=O)=O)C=C(C(OCOC(C)=O)=O)C=C6)=C7)=C7C=C5OC)CCOCCOCC4 | ||
| 分子式 | C58H62N2O24 | 分子量 | 1171.1 |
| 溶解度 | Soluble in methanol and DMSO | 储存条件 | Store at -20°C |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
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| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 853.9 μL | 4.2695 mL | 8.539 mL |
| 5 mM | 170.8 μL | 853.9 μL | 1.7078 mL |
| 10 mM | 85.4 μL | 426.9 μL | 853.9 μL |
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
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