MOCAc-PLGL(Dpa)AR
目录号 : GC17832
MOCAc-PLGL(Dpa)AR是一种专为检测基质金属蛋白酶设计的荧光底物，适用于MMP-2、MMP-7和MMP-9的活性测定。
Cas No.:140430-53-1
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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MOCAc-PLGL(Dpa)AR is a fluorescent substrate specifically designed for the detection of matrix metalloproteinases (MMPs), which is suitable for the activity of MMP-2, MMP-7 and MMP-9[1]. After hydrolysis of MOCAc-PLGL(Dpa)AR, the fluorescence intensity changed at the excitation wavelength of 328nm and the emission wavelength of 393nm[2]. MOCAc-PLGL(Dpa)AR has been widely used as a fluorescent indicator to study the inhibitory effect of alcohols on protease activity of thermophilic bacteria[3].
References:
[1] Muta Y, Yasui N, Matsumiya Y, et al. Expression in Escherichia coli, refolding, and purification of the recombinant mature form of human matrix metalloproteinase 7 (MMP-7)[J]. Bioscience, biotechnology, and biochemistry, 2010, 74(12): 2515-2517.
[2] Muta Y, Oneda H, Inouye K. Anomalous pH-dependence of the activity of human matrilysin (matrix metalloproteinase-7) as revealed by nitration and amination of its tyrosine residues[J]. Biochemical Journal, 2005, 386(2): 263-270.
[3] Muta Y, Inouye K. Inhibitory effects of alcohols on thermolysin activity as examined using a fluorescent substrate[J]. The Journal of Biochemistry, 2002, 132(6): 945-951.
MOCAc-PLGL(Dpa)AR是一种专为检测基质金属蛋白酶设计的荧光底物，适用于MMP-2、MMP-7和MMP-9的活性测定[1]。MOCAc-PLGL(Dpa)AR水解后，在328nm激发波长和393 nm发射波长下可观测到荧光强度变化[2]。MOCAc-PLGL(Dpa)AR已作为荧光指示剂广泛应用于研究醇类对嗜热菌蛋白酶活性的抑制作用[3]。
基于MOCAc-PLGL(Dpa)AR的荧光测定法
本方案仅提供指南，应根据您的具体需要进行修改。
1. 试剂配制
(1)称取MOCAc-PLGL(Dpa)AR固体，添加DMSO配制成10mM储备液。
(2) 吸取一些储备液，然后加入检测缓冲液（50mM Tris-HCl、10mM CaCl2、150mM NaCl、0.05% Brij-35; pH7.5）配制成100µM工作液。工作液应现配现用。
2. 制备反应体系
(1)在96孔板中建立总积为200µl的反应体系，加入160µl的检测缓冲液作为基础液相。
(2)加入由100µM工作液稀释的20µl MOCAc-PLGL(Dpa)AR，在孔中最终浓度为10µM。
(3)最后用移液管快速加入浓度为10×的metalloproteinase酶原液20µl，触发酶解反应。酶在孔中的终浓度通常为0.1-0.5µM，具体值可根据预实验进行调整。
3. 检测与分析
Metalloproteinase酶溶液加入后立即振荡混合5秒，放入预热至37℃的酶标仪中，在328/393nm处开始荧光检测。
4. 关键注意事项
(1) MOCAc-PLGL(Dpa)AR对光敏感，整个过程应避光（铝箔包裹板盖）。
(2)尽快将酶稀释并使用。
(3)当荧光读数超过仪器上限时，适当增加底物浓度即可。
References:
[1] Muta Y, Oneda H, Inouye K. Anomalous pH-dependence of the activity of human matrilysin (matrix metalloproteinase-7) as revealed by nitration and amination of its tyrosine residues[J]. Biochemical Journal, 2005, 386(2): 263-270.
| Cas No. | 140430-53-1 | SDF | |
| 化学名 | (2R)-N-((6S,9S,12S,16R,22R)-1,12-diamino-6-carbamoyl-13-(2,4-dinitrophenyl)-1-imino-16-isobutyl-9,24-dimethyl-8,11,15,18,21-pentaoxo-2,7,10,14,17,20-hexaazapentacosan-22-yl)-1-(2-(7-methoxy-2-oxo-2H-chromen-4-yl)acetyl)pyrrolidine-2-carboxamide | ||
| Canonical SMILES | COC1=CC=C(C(CC(N2CCC[C@@H]2C(N[C@H](CC(C)C)C(NCC(N[C@H](CC(C)C)C(NC([C@H](C(N[C@@H](C(N[C@@H](C(N)=O)CCCNC(N)=N)=O)C)=O)N)C3=CC=C([N+]([O-])=O)C=C3[N+]([O-])=O)=O)=O)=O)=O)=O)=CC(O4)=O)C4=C1 | ||
| 分子式 | C49H68N14O15 | 分子量 | 1093.15 |
| 溶解度 | DMSO : 100 mg/mL (91.48 mM; ultrasonic and warming and heat to 60°C) | 储存条件 | Store at -20°C |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
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| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
 |
1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 914.8 μL | 4.5739 mL | 9.1479 mL |
| 5 mM | 183 μL | 914.8 μL | 1.8296 mL |
| 10 mM | 91.5 μL | 457.4 μL | 914.8 μL |
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
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