Biocytin
(Synonyms: 生物胞素; (+)-Biocytin) 目录号 : GC14990
Biocytin是一种由D-生物素和L-赖氨酸通过仲酰胺键结合而成的化合物，Biocytin可作为经典的神经解剖学示踪剂，利用与抗生物素蛋白的高亲和力结合特性，实现对神经元形态和连接的精确定位。
Cas No.:576-19-2
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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Biocytin is a compound formed by the linkage of D-biotin and L-lysine via a secondary amide bond. Biocytin serves as a classic neuroanatomical tracer, utilizing its high-affinity binding to avidin for precise localization of neuronal morphology and connectivity. Biocytin is primarily used in neural circuit mapping, biotinidase activity assays, and related diagnostic research[1-2].
References:
[1] McDonald AJ. Neuroanatomical labeling with biocytin: a review. Neuroreport. 1992 Oct;3(10):821-7.
[2] Ebrahim H, Dakshinamurti K. Determination of biocytin. Anal Biochem. 1987 May 1;162(2):319-24.
Biocytin是一种由D-生物素和L-赖氨酸通过仲酰胺键结合而成的化合物，Biocytin可作为经典的神经解剖学示踪剂，利用与抗生物素蛋白的高亲和力结合特性，实现对神经元形态和连接的精确定位。Biocytin主要用于神经环路绘制、生物素酶活性测定及相关诊断研究[1-2]。
Biocytin全细胞记录示踪法
本实验方案根据研究内容整理，仅供参考，请根据实际需求进行调整。
（1）试剂与电极准备：配制含0.1% Biocytin的细胞内液（成分：110mM K-葡萄糖酸盐、10mM NaCl、1mM MgCl₂、10mM EGTA、40mM HEPES、2mM Mg-ATP、0.3mM Na-GTP，pH=7.3，渗透压280-300mOsm）。根据目标神经元大小控制玻璃电极电阻（中型多棘神经元：6-8MΩ；椎体神经元/小白蛋白中间神经元：5-6MΩ），电极尖端需无气泡。
（2）脑片制备与神经元定位：取3月龄小鼠脑组织，用振动切片机制备含初级运动皮层（M1）或纹状体的冠状切片（厚度320μm）。切片在含氧人工脑脊液（aCSF）中恢复1小时后，置于恒温灌流记录槽（30°C）。通过红外微分干涉对比（IR-DIC）显微镜识别神经元形态（椎体神经元呈泪滴形，中型多棘神经元呈椭圆形）。
（3）全细胞记录与生物胞素加载：电极接触细胞膜后施加负压形成吉欧封接，短时强吸破膜建立全细胞模式。在电流钳模式下记录动作电位（AP），随后维持全细胞模式40-60分钟，使生物胞素充分扩散至神经元树突、轴突等精细结构。缓慢撤出电极使细胞膜重密封。
（4）组织固定与荧光显色：记录后的脑片用4%多聚甲醛4°C固定24小时，经1% Triton-X100透化后，与链霉亲和素-Alexa 594（红色）或Alexa 488（绿色）荧光等探针（1:1000稀释）4°C孵育24小时。
（5）形态学成像与分析：通过共聚焦显微镜（63×油镜）在相对应的荧光信号下，采集神经元Z轴层扫图像（层间距0.2μm）。使用ImageJ软件进行三维重建，分析树突总长度、分支复杂度（Sholl分析）及树突棘密度（单位长度树突上的棘数量）。
注意事项：
（1）实验需遵循动物伦理规范。
（2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
References:
[1] Tan S, Mo X, Qin H, et al. Biocytin-Labeling in Whole-Cell Recording: Electrophysiological and Morphological Properties of Pyramidal Neurons in CYLD-Deficient Mice. Molecules. 2023 May 15;28(10):4092.
| Cas No. | 576-19-2 | SDF | |
| 别名 | 生物胞素; (+)-Biocytin | ||
| 化学名 | (S)-2-amino-6-(5-((3aS,4S,6aR)-2-oxohexahydro-1H-thieno[3,4-d]imidazol-4-yl)pentanamido)hexanoic acid | ||
| Canonical SMILES | O=C1N[C@H]([C@H](CCCCC(NCCCC[C@@H](C(O)=O)N)=O)SC2)[C@H]2N1 | ||
| 分子式 | C16H28N4O4S | 分子量 | 372.48 |
| 溶解度 | Water:35mg/ml | 储存条件 | Store at -20°C |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
||
| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
 |
1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 2.6847 mL | 13.4235 mL | 26.8471 mL |
| 5 mM | 536.9 μL | 2.6847 mL | 5.3694 mL |
| 10 mM | 268.5 μL | 1.3424 mL | 2.6847 mL |
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
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