Lugol's iodine solution (Gram stain)

操作步骤：(仅供参考)
以革兰氏染色为例：
1.涂片固定
菌液涂片，干燥、固定。固定时通过火焰 3-4 次即可，均匀受热，以载玻片不烫手为宜。
2.染色
一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作方法是：
(1)加上结晶紫后，染色 1 分钟，水洗。
(2)加上碘液后染色 1 分钟，水洗。
(3)加上脱色液，摇动玻片，根据涂片厚度，脱色约 20-60 秒，水洗，吸去水分。
(4)加上番红后，染色 1 分钟，水洗。
(5)吸干或在空气中凉干后，油镜镜检。
革兰氏染色的关键在于严格掌握脱色程度，如脱色过度，则阳性菌可被误染为阴性菌：而脱色不够时，阴性菌可被误染为阳性菌。此外，菌龄也影响染色结果，如阳性菌培养时间过长，或已死亡及部分菌体自行溶解，都常呈阴性反应。
3. 结果观察：
革兰氏阳性菌：紫色
革兰氏阴性菌：红色
注意事项：
1.标本涂片不能太厚，严格按操作要求进行。若涂片较厚，应延长脱色时间，直至脱色液不再出现紫色为止。
2.玻片通过火焰温度不能太高。
3.碘液变透明，则不能使用。
4.水洗时动作要轻柔，沿载玻片对角线方向用洗瓶冲洗，以免把菌体冲掉。