Trypan Blue Stain solution(0.4%)
目录号 : GF00376台盼蓝(Diphenyl Blue or Trypan Blue)是一种不渗透性染料,活细胞细胞膜结构完整,无法摄取,故而常用于检测细胞 膜的完整性与细胞的存活率。
Cas No.:72-57-1
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
台盼蓝(Diphenyl Blue or Trypan Blue)是一种不渗透性染料,活细胞细胞膜结构完整,无法摄取,故而常用于检测细胞膜的完整性与细胞的存活率。台盼蓝染色是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一,丧失活性或细胞膜不完整的细胞可被台盼蓝染成蓝色。通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡。台盼蓝染色后,通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数,就可以对细胞存活率进行比较精确的定量。
台盼蓝可被巨噬细胞吞噬,故而常用于巨噬细胞的活体染色。凋亡小体也有台盼蓝拒染现象。
本产品为使用0.85% Nacl配制的0.4%台盼蓝储存液。储存液建议分装后于4°C 避光保存,一年有效。
工作液的配制
使用无血清细胞培养基或PBS稀释储存液,配制成浓度为0.04%的台盼蓝工作液。
注:请根据实验需求调整台盼蓝工作液浓度,现用现配。
细胞染色
1、悬浮细胞:离心收集细胞,加入PBS洗涤两次,每次5分钟。
贴壁细胞:除去培养基,加入胰蛋白酶消化细胞。离心后弃上清,加入PBS 洗涤两次,每次5分钟。
2、加入1mL台盼蓝工作液,室温条件下孵育5分钟。
3、400g、4°C离心3-4分钟,弃去上清,加入PBS洗涤细胞两次,每次5分钟。
4、用1mL无血清培养基或PBS重悬细胞。通过显微镜计数或显微镜下拍照后计数计算细胞存活率。
细胞存活率(%)=活细胞总数/(活细胞总数+死细胞总数)*100%
注意事项:
1.染色时间不能太长,否则活细胞也会逐渐积累染料而染成颜色,使检测结果偏低。
2.染色前染液若有沉淀,需过滤除掉沉淀后再用。
3.有潜在致癌危险,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。