ER-Tracker Blue-White DPX
(Synonyms: 蓝色内质网探针) 目录号 : GB30171
ER-Tracker Blue-White DPX 内质网蓝色荧光探针;ER-Trackerdyes是一系列细胞膜渗透性的活细胞染料，高度选择性结合内质网（ER）。
Cas No.:287715-95-1
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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ER-Tracker Blue-White DPX 内质网蓝色荧光探针;ER-Trackerdyes是一系列细胞膜渗透性的活细胞染料，高度选择性结合内质网（ER）。不同于传统的内质网染料DiOC6(3)，该系列染料极少染色线粒体，且低浓度下染色无细胞毒性。使用提供的优化步骤对细胞染色和甲醛处理后，可以保留部分的活细胞染色特征。ER-Tracker Blue-White DPX是Dapoxyl (DPX)染料家族的成员之一，这类染料具有长发射波长，高吸光系数，高量子产量和宽广的斯托克频移特征。这类染料属于环境敏感型的探针，随着溶剂极性的增加，大荧光迁移到更长的波长，伴随着光量子产量降低。本品为DMSO储存液，浓度为1mM。用于活细胞内质网染色，建议工作浓度为100nM-1µM，需根据实际情况做优化调整。
本方案仅提供一个指导，请根据您的具体需要进行修改。
1.染色液的制备
(1)本产品以浓度为1mM的DMSO储存液形式提供。取出冻存的染色液，恢复至室温后，通过瞬时离心将染液集中在管底。
(2)建议使用37℃预热的无血清培养基或PBS稀释储存液，配制浓度为100nM-1μM的染料工作液。
注意:请根据实际情况调整工作液浓度，现用现配。
2.细胞悬浮染色
（1）悬浮细胞经4°C、1000g离心3-5分钟，弃去上清液，使用PBS清洗两次，每次5分钟。
（2）贴壁细胞使用PBS清洗两次，加入胰酶消化细胞，消化完成后经1000g离心3-5min。
（2）加入1mL的染料工作溶液重悬细胞，室温避光孵育5-30分钟。
注意：不同的细胞最佳培养时间不同，可以根据具体实验需求进行调整。
（3）孵育结束后，经1000g离心5分钟，去除上清液，加入PBS清洗2-3次，每次5分钟。
（4）用预温的无血清细胞培养基或PBS重悬细胞。通过荧光显微镜或流式细胞术观察。
3.细胞贴壁染色
（1）在无菌盖玻片上培养贴壁细胞。
（2）从培养基中移走盖玻片，吸出过量的培养基，将盖玻片放在潮湿的环境中。
（3）从盖玻片的一角加入100uL的染料工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。
（4）室温避光孵育5-30分钟，不同的细胞最佳培养时间不同。
（5）孵育结束后吸弃染料工作液，用预温的培养液洗盖玻片2~3次。
4.显微镜检测：ER–Tracker Blue–White DPX的最大激发/发射光分别为374/430-640nm。
注意事项：
① 甲醛在37℃下固定染色细胞10-20分钟后，ER–Tracker Blue–White DPX信号仅部分保留。如果要固定染色细胞，建议使用4%甲醛37℃固定2分钟。
② 如果要进行额外的染色，建议使用0.2% Triton X-100对细胞透化10分钟。
③ 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
④ 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
| Cas No. | 287715-95-1 | SDF | |
| 别名 | 蓝色内质网探针 | ||
| 分子式 | C26H21F5N4O4S | 分子量 | 580.5283 |
| 溶解度 | DMSO : 5 mg/mL (8.61 mM; ultrasonic and warming and heat to 60°C) | 储存条件 | Store at -20°C, protect from light |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
||
| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
 |
1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 1.7226 mL | 8.6128 mL | 17.2257 mL |
| 5 mM | 344.5 μL | 1.7226 mL | 3.4451 mL |
| 10 mM | 172.3 μL | 861.3 μL | 1.7226 mL |
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
- View current batch:
- Purity: >98.00%
- COA (Certificate Of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet