FlAsH-EDT2
(Synonyms: 荧光含砷螺旋粘结剂/卢米奥绿色,Fluorescein Arsenical Helix Binder, Lumio Green) 目录号 : GC43674FlAsH-EDT2是一种荧光生物砷染料，用于标记四半胱氨酸标签的蛋白质。FlAsH-EDT2能够穿过细胞膜，因此可以用于标记活细胞中的蛋白质，包括细胞内和细胞表面的蛋白质。
Cas No.:212118-77-9
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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FlAsH-EDT2 is a fluorescent biarsenical dye used for labeling proteins tagged with tetracysteine motifs. FlAsH-EDT2 can cross the cell membrane, making FlAsH-EDT2 suitable for labeling proteins in living cells, including both intracellular and cell surface proteins.
References:
[1] Hoffmann C, Gaietta G, Zürn A, et al. Fluorescent labeling of tetracysteine-tagged proteins in intact cells. Nat Protoc. 2010 Sep;5(10):1666-77.
FlAsH-EDT2是一种荧光生物砷染料，用于标记四半胱氨酸标签的蛋白质。FlAsH-EDT2能够穿过细胞膜，因此可以用于标记活细胞中的蛋白质，包括细胞内和细胞表面的蛋白质。
用FlAsH-EDT2标记四半胱氨酸（tetracysteine）所标记的蛋白质[1]
本方案仅提供一个指导，请根据您的具体需要进行修改。
细胞标记：
1、用2ml的HBSS/葡萄糖溶液洗涤细胞两次。
2、每个样本加入1ml的HBSS/葡萄糖溶液转移到Falcon管中。
3、从HBSS/葡萄糖溶液中取出50-100µl加入到FlAsH-EDT2溶液中，混合均匀。
4、将混合后的溶液加入到Falcon管中，确保溶液均匀。
5、每个培养皿加入1ml这种溶液，轻轻旋转培养皿以确保初步混合。
6、在37°C（适当提供湿润的环境和CO₂）下孵育1小时。标记过程中，体系浓度为500nM FlAsH-EDT2、12.5µM EDT（1,2-ethanedithiol）和0.1%（体积比）DMSO。
去除多余和非特异性结合的染料
7、洗涤溶液的准备：用DMSO配制500mM的EDT溶液。
8、用含有250µM EDT的HBSS/葡萄糖溶液洗涤细胞10分钟。
9、用HBSS/葡萄糖溶液（不含EDT）洗涤细胞2-3次，以减少EDT的残留。
10、重复洗涤步骤1或2次，以进一步减少背景荧光。
11、成像：共聚焦显微镜：使用514nm的氩激光直接激发FlAsH，记录其荧光发射。
References:
[1] Hoffmann C, Gaietta G, Zürn A, et al. Fluorescent labeling of tetracysteine-tagged proteins in intact cells. Nat Protoc. 2010 Sep;5(10):1666-77.
| Cas No. | 212118-77-9 | SDF | |
| 别名 | 荧光含砷螺旋粘结剂/卢米奥绿色,Fluorescein Arsenical Helix Binder, Lumio Green | ||
| 化学名 | 4',5'-bis(1,3,2-dithiarsolan-2-yl)-3',6'-dihydroxy-spiro[isobenzofuran-1(3H),9'-[9H]xanthen]-3-one | ||
| Canonical SMILES | OC1=C([As]2SCCS2)C3=C(C4(C(C=CC=C5)=C5C(O4)=O)C6=CC=C(O)C([As]7SCCS7)=C6O3)C=C1 | ||
| 分子式 | C24H18As2O5S4 | 分子量 | 664.5 |
| 溶解度 | DMF: 15 mg/ml,DMSO: 20 mg/ml,DMSO:PBS (pH 7.2) (1:10): 0.09 mg/ml | 储存条件 | Store at -20°C,protect from light |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
||
| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
 |
1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 1.5049 mL | 7.5245 mL | 15.0489 mL |
| 5 mM | 0.301 mL | 1.5049 mL | 3.0098 mL |
| 10 mM | 0.1505 mL | 0.7524 mL | 1.5049 mL |
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
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