FITC-Palmitic acid

1. 储存溶液的制备

除非另有说明，所有未使用的储备溶液应分成一次性等份，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环

FITC-棕榈酸储备液

将适量的 FITC-Palmitic acid （FITC-棕榈酸）溶解在 DMSO 中，制备 5 至 10 mM 储备液。

注意：例如，要制备 5 mM DMSO 储存溶液，请将 1 mg FITC-棕榈酸溶解在 235 uL DMSO 中。

2.工作液的配制

FITC-棕榈酸工作液

通过在 HHBS 中稀释储备液来制备 5 至 10 μM FITC-棕榈酸工作溶液。

注意：使用前配制新鲜的工作溶液

3.实验方案示例

以下协议可用作指南。 如果需要，优化协议以达到预期结果。

1. 根据需要培养细胞。

2. 除去细胞培养基。

注意：必须除去细胞培养基，因为它可能会干扰缀合物染色。

3. 每孔加入 100 μL FITC-棕榈酸工作液。

4. 将细胞在黑暗中室温孵育 30 分钟。

5. 除去 FITC-棕榈酸工作液，用 HHBS 洗涤细胞两次。

6. 将 HHBS 缓冲液添加到细胞中，并使用带有 FITC 滤光片组的荧光显微镜观察细胞。

7. 可选：染色后可固定细胞。

Hela 细胞用 FITC-棕榈酸染色，然后用 4% 甲醛固定的图像。 将活 Hela 细胞在 96 孔板中培养过夜，染色前除去培养基。 将 HHBS 缓冲液中的 100 µL FITC-棕榈酸 (10 µM) 添加到每个孔中。 细胞在室温下染色30分钟，用HHBS缓冲液洗涤两次，然后用4%甲醛固定。 在固定之前和之后使用 FITC 滤光片对细胞进行成像。