BODIPY 665/676 Lipid Peroxide Fluorescent Probe
(Synonyms: BODIPY 665/676;C11 BODIPY 581/591;Lipid Peroxidation Sensor;脂质过氧化感受器;铁死亡(Ferroptosis);FeRhoNox-1(Fe2+ indicator)亚铁离子荧光探针;) 目录号 : GC26345BODIPY 665/676是一种亲脂性荧光探针,高亲和力结合游离脂肪酸和甘油三酯,具有长波长的最大吸收波长(λex=665nm)和最大荧光发射波长(Em=676nm)[1]。
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
Quality Control & SDS
- View current batch:
- Purity: >98.00%
- COA (Certificate Of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet
本方案仅提供一个指导,请根据您的具体需要进行修改。
1.染色液的制备
(1)配置储存液:使用DMSO溶解BODIPY 665/676,配置浓度为1-10mM的储存液。
注意:未使用的储存液分装后在-20℃或-80℃避光保存,避免反复冻融。
(2)配置工作液:使用合适的缓冲液(如:无血清培养基或PBS)稀释储存液,配制浓度为1-10μM的工作液。
注意:请根据实际情况调整工作液浓度,现用现配。
2.细胞悬浮染色
(1)悬浮细胞:经1000g离心3-5分钟,弃去上清液,用PBS清洗两次,每次5分钟。
(2)贴壁细胞:使用PBS清洗两次,加入胰酶消化细胞,消化完成后经1000g离心3-5min。
(3)加入的BODIPY 665/676工作溶液重悬约细胞,37℃避光孵育30分钟。不同细胞最佳孵育时间不同,请根据具体实验需求自行摸索。
(4)孵育结束后,经1000g离心5分钟,去除上清液,加入PBS清洗2-3次,每次5分钟。
(5)用预温的无血清细胞培养基或PBS重悬细胞,通过荧光显微镜或流式细胞术观察。
3.细胞贴壁染色
(1)在无菌盖玻片上培养贴壁细胞。
(2)从培养基中移走盖玻片,吸出过量的培养基,将盖玻片放在潮湿的环境中。
(3)从盖玻片的一角加入100μL的染料工作液,轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。
(4) 37℃避光孵育30分钟。不同细胞最佳孵育时间不同,请根据具体实验需求自行摸索。
(5)孵育结束后吸弃染料工作液,使用预温的培养液清洗盖玻片2~3次。
4.显微镜检测:BODIPY 665/676的最大激发/发射波长为665/676nm。BODIPY 665/676被氧化后,最大发射波长迁移到605nm(最大激发光为580nm)
注意事项:
①荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭;
②为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
BODIPY 665/676 is a lipophilic fluorescent probe with high affinity for binding free fatty acids and triglycerides, with a maximum absorption wavelength of long wavelength( λ Ex=665nm) and maximum fluorescence emission wavelength (Em=676nm) [1]. Similar to the commonly used lipid peroxidation probe C11 BODIPY 581/591 (MX5211-1MG), BODIPY 665/676 is easily oxidized by peroxides. Once oxidized, the maximum emission wavelength shifts to 605nm( λ Ex=580 nm) [2-4]. The most important advantage of BODIPY 665/676 is that its emission wavelength is 676nm, which does not cross with the majority of fluorescein, thus avoiding interference such as self fluorescence. BODIPY 665/676 exhibits thermal stability and high hydrophobicity, thus preventing the diffusion of lipid droplets. The exciter at 642nm is close to the maximum absorption wavelength at 665nm, thus obtaining a strong fluorescence signal at very low probe concentrations [5].
BODIPY 665/676是一种亲脂性荧光探针,高亲和力结合游离脂肪酸和甘油三酯,具有长波长的最大吸收波长(λex=665nm)和最大荧光发射波长(Em=676nm)[1]。与常用的脂质过氧化探针C11 BODIPY 581/591(MX5211-1MG)相似,BODIPY 665/676容易被过氧化自由基氧化,一旦氧化,最大发射波长迁移到605nm(λex=580 nm) [2-4]。BODIPY 665/676最重要的优势在于发射波长是676nm,与绝大部分的荧光素之间无交叉,从而能避免比如自荧光的干扰。BODIPY 665/676具热稳定和高度疏水性特征,从而不会扩散出脂滴。激发器642nm与最大吸收波长665nm接近,由此,在很低的探针浓度下就能得到强荧光信号[5]。
Cas No. | SDF | ||
别名 | BODIPY 665/676;C11 BODIPY 581/591;Lipid Peroxidation Sensor;脂质过氧化感受器;铁死亡(Ferroptosis);FeRhoNox-1(Fe2+ indicator)亚铁离子荧光探针; | ||
分子式 | 分子量 | 448.32 | |
溶解度 | 储存条件 | -20 ℃ Dry at in a dark place | |
General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限:-80°C 储存时,请在 6 个月内使用,-20°C 储存时,请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度,请将管子加热至37℃,然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
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Shipping Condition | 评估样品解决方案:配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸:配备RT,或根据请求配备蓝冰。 |
制备储备液 | |||
1 mg | 5 mg | 10 mg | |
1 mM | 2.2305 mL | 11.1527 mL | 22.3055 mL |
5 mM | 0.4461 mL | 2.2305 mL | 4.4611 mL |
10 mM | 0.2231 mL | 1.1153 mL | 2.2305 mL |
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量) | ||||||||||
给药剂量 | mg/kg | 动物平均体重 | g | 每只动物给药体积 | ul | 动物数量 | 只 | |||
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶于水的药物;不同批次药物配方比例不同,请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方) | ||||||||||
% DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
计算重置 |
计算结果:
工作液浓度: mg/ml;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL,
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL saline,混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的;
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。