Biotin-4-aminophenol
目录号 : GC66466
Biotin-4-aminophenol是一种将生物素与 4-氨基苯酚融合的化合物。Biotin-4-aminophenol被广泛用作标记蛋白质和核酸的生物偶联物,Biotin-4-aminophenol是各种生化测定和分子生物学技术的关键参与者。
Cas No.:901770-40-9
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
Biotin-4-aminophenol is a compound that fuses biotin with 4-aminophenol. Biotin-4-aminophenol is widely used as a bioconjugate for labeling proteins and nucleic acids, and Biotin-4-aminophenol is a key player in a variety of biochemical assays and molecular biology techniques[1]. Biotin, which is also known as vitamin H or coenzyme R, is a water-soluble B-complex vitamin that’s crucial for cell growth, metabolism, and gene expression[2]. The 4-aminophenol moiety provides a reactive group that can be easily conjugated to other molecules[3]. This makes biotin-4-aminophenol super useful for labeling biomacromolecules (proteins, nucleic acids), allowing for detection and quantification through the powerful streptavidin-biotin interaction.biotin-4-aminophenol is used in all sorts of applications, like enzyme-linked immunosorbent assays (ELISA), fluorescence microscopy, and flow cytometry[1].
References:
[1] Ke M, Yuan X, He A, et al. Spatiotemporal profiling of cytosolic signaling complexes in living cells by selective proximity proteomics. Nat Commun. 2021 Jan 4;12(1):71.
[2] Said HM. Biotin: biochemical, physiological and clinical aspects. Subcell Biochem. 2012;56:1-19.
[3] Murakami K, Yoshino M. Prooxidant activity of aminophenol compounds: copper-dependent generation of reactive oxygen species. Biometals. 2022 Apr;35(2):329-334.
Biotin-4-aminophenol是一种将生物素与 4-氨基苯酚融合的化合物。Biotin-4-aminophenol被广泛用作标记蛋白质和核酸的生物偶联物,Biotin-4-aminophenol是各种生化测定和分子生物学技术的关键参与者[1]。生物素也称为维生素 H 或辅酶 R,是一种水溶性 B 族复合维生素,对细胞生长、新陈代谢和基因表达至关重要[2]。4-氨基苯酚部分提供了一个反应性基团,可以很容易地与其他分子偶联[3]。这使得Biotin-4-aminophenol对标记生物大分子(蛋白质、核酸)非常有用,允许通过强大的链霉亲和素-生物素相互作用进行检测和定量,Biotin-4-aminophenol用于各种应用,如酶联免疫吸附测定 (ELISA)、荧光显微镜和流式细胞术[1]。
标记步骤
1. 试剂准备
Biotin-4-aminophenol:溶于 DMSO 或 DMF(终浓度 10-50mM)。
猝灭缓冲液:10mM叠氮化钠,10mM抗坏血酸,5mM Trolox,溶于DPBS。
裂解液:RIPA裂解缓冲液。
2.细胞裂解
用RIPA裂解缓冲液裂解细胞,超声处理后离心,收集上清液。
与蛋白质偶联
将细胞裂解液与Biotin-4-aminophenol(500µM)孵育30min,加入淬灭缓冲液停止反应。
3. 捕获标记蛋白
用链霉亲和素琼脂糖珠富集生物素化的蛋白质。
4. 标记效率检测
紫外分光光度法:测定 280nm(蛋白质)和 228nm(生物素)的吸光度,计算生物素 / 蛋白质摩尔比。
ELISA 法:使用链霉亲和素-HRP 偶联物检测固定在板上的标记蛋白,通过 OD 值量化标记效率。
[1] Ke M, Yuan X, He A, et al. Spatiotemporal profiling of cytosolic signaling complexes in living cells by selective proximity proteomics. Nat Commun. 2021 Jan 4;12(1):71.
Cas No. | 901770-40-9 | SDF | Download SDF |
分子式 | C16H21N3O3S | 分子量 | 335.42 |
溶解度 | DMSO : 100 mg/mL (298.13 mM; ultrasonic and warming and heat to 60°C) | 储存条件 | Store at -20°C |
General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限:-80°C 储存时,请在 6 个月内使用,-20°C 储存时,请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度,请将管子加热至37℃,然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
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Shipping Condition | 评估样品解决方案:配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸:配备RT,或根据请求配备蓝冰。 |
制备储备液 | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
1 mM | 2.9813 mL | 14.9067 mL | 29.8134 mL |
5 mM | 0.5963 mL | 2.9813 mL | 5.9627 mL |
10 mM | 0.2981 mL | 1.4907 mL | 2.9813 mL |
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量) | ||||||||||
给药剂量 | mg/kg | 动物平均体重 | g | 每只动物给药体积 | ul | 动物数量 | 只 | |||
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶于水的药物;不同批次药物配方比例不同,请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方) | ||||||||||
% DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
计算重置 |
计算结果:
工作液浓度: mg/ml;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL,
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL saline,混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的;
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
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