ATP-Red 1
目录号 : GC30265
ATP-Red 1是一种可切换的多位点荧光探针，用于快速、选择性地监测活细胞中ATP（三磷酸腺苷）浓度的变化（激发/发射波长= 510/590nm）。
Cas No.:1847485-97-5
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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ATP-Red 1 is a switchable, multi-site fluorescent probe designed for rapid and selective monitoring of ATP (adenosine triphosphate) concentration changes in living cells (Ex/Em = 510/590nm) [1]. When unbound to ATP, ATP-Red 1 exhibits a closed ring structure and is virtually non-fluorescent. Upon ATP binding, the ring opens, emitting red fluorescence, clearly reflecting ATP levels [2-3].
References:
[1]. Wang L, Yuan L, Zeng X, et al. A multisite‐binding switchable fluorescent probe for monitoring mitochondrial ATP level fluctuation in live cells[J]. Angewandte Chemie International Edition, 2016, 55(5): 1773-1776.
[2]. Fiorillo M, Ózsvári B, Sotgia F, et al. High ATP production fuels cancer drug resistance and metastasis: implications for mitochondrial ATP depletion therapy[J]. Frontiers in oncology, 2021, 11: 740720.
[3]. Ren T B, Wen S Y, Wang L, et al. Engineering a reversible fluorescent probe for real-time live-cell imaging and quantification of mitochondrial ATP[J]. Analytical Chemistry, 2020, 92(6): 4681-4688.
ATP-Red 1是一种可切换的多位点荧光探针，用于快速、选择性地监测活细胞中ATP（三磷酸腺苷）浓度的变化（激发/发射波长= 510/590nm） [1]。未与ATP结合时，ATP-Red 1呈现闭环结构，几乎不发荧光。与ATP结合后，环打开，发出红色荧光，清晰地反映ATP水平 [2-3]。
本实验方案仅提供实验指导。实际应用需根据您的研究目标、细胞类型以及成像或分析平台进行优化和调整 [1-2]。
1. 试剂及材料准备
ATP-Red 1、DMSO、PBS、贴壁细胞或悬浮细胞。
2. 探针配置
（1）原液制备：将冻干的ATP-Red 1溶于DMSO中，配制成5-10mM原液，分装后-80℃避光保存。
（2）工作液制备：将原液用PBS稀释至终浓度为1-10µM（通常范围为5-10µM，需根据细胞类型进行优化）。
3. 染色步骤
（1）贴壁细胞：弃去培养基，加入适量ATP-Red 1工作液（例如，每孔100-500µL）。室温或37℃避光孵育15-30分钟。染色后，可用PBS洗涤细胞1-2次，然后进行成像或直接进行流式细胞术分析。
（2）悬浮细胞：收获后，离心并用PBS洗涤1-2次。用ATP-Red 1工作液重悬，室温或37℃孵育15-30分钟。染色后，离心并避光洗涤，置于分析平台上观察。
4. 成像和检测参数
荧光显微镜：建议使用激发/发射波长范围约为570-590nm的Cy3/TRITC滤光片。
操作注意事项：
（1）避免光照，以减少荧光猝灭。
（2）将原液分装保存，避免反复冻融，以免降低活性。
（3）必须通过梯度实验优化每个细胞系的探针浓度和染色时间。
（4）使用稳定的阳性/阴性对照（例如KCN处理以降低ATP）以提高实验可靠性。
References:
[1]. Fiorillo M, Ózsvári B, Sotgia F, et al. High ATP production fuels cancer drug resistance and metastasis: implications for mitochondrial ATP depletion therapy[J]. Frontiers in oncology, 2021, 11: 740720.
[2]. Ren T B, Wen S Y, Wang L, et al. Engineering a reversible fluorescent probe for real-time live-cell imaging and quantification of mitochondrial ATP[J]. Analytical Chemistry, 2020, 92(6): 4681-4688.
| Cas No. | 1847485-97-5 | SDF | |
| Canonical SMILES | O=C1N(C2=CC=CC=C2B(O)O)C3(C4=C(OC5=C3C=CC(N(CC)CC)=C5)C=C(N(CC)CC)C=C4)C6=C1C=CC=C6 | ||
| 分子式 | C34H36BN3O4 | 分子量 | 561.48 |
| 溶解度 | DMSO : 50 mg/mL (89.05 mM);Water : < 0.1 mg/mL (insoluble) | 储存条件 | Store at 2-8°C,protect from light |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
||
| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
 |
1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 1.781 mL | 8.905 mL | 17.8101 mL |
| 5 mM | 0.3562 mL | 1.781 mL | 3.562 mL |
| 10 mM | 0.1781 mL | 0.8905 mL | 1.781 mL |
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
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