Z-Gly-Gly-Arg-AMC
目录号 : GC33547
Z-Gly-Gly-Arg-AMC是一种特异性凝血酶荧光底物，激发波长为355nm，发射波长为460nm。
Cas No.:66216-78-2
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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Z-Gly-Gly-Arg-AMC is a specific thrombin fluorescent substrate with λexc = 355nm, λem = 460nm[1]. Z-Gly-Gly-Arg-AMC acts as the reference substrate in the Calibrated Automated Thrombogram (CAT) for measuring endogenous thrombin potential (ETP) in platelet-rich (PRP) or platelet-poor plasma (PPP)[2]. Z-Gly-Gly-Arg-AMC is employed in 96-well format for rapid identification and potency ranking of direct thrombin inhibitors or protease-activated receptor antagonists[3].
References:
[1] Tarandovskiy I D, Artemenko E O, Panteleev M A, et al. Antiplatelet agents can promote two-peaked thrombin generation in platelet rich plasma: mechanism and possible applications[J]. PLoS One, 2013, 8(2): e55688.
[2] Machlus K R, Colby E A, Wu J R, et al. Effects of tissue factor, thrombomodulin and elevated clotting factor levels on thrombin generation in the calibrated automated thrombogram[J]. Thrombosis and haemostasis, 2009, 102(11): 936-944.
[3] Kale S S, Bergeron-Brlek M, Wu Y, et al. Thiol-to-amine cyclization reaction enables screening of large libraries of macrocyclic compounds and the generation of sub-kilodalton ligands[J]. Science advances, 2019, 5(8): eaaw2851.
Z-Gly-Gly-Arg-AMC是一种特异性凝血酶荧光底物，激发波长为355nm，发射波长为460nm[1]。Z-Gly-Gly-Arg-AMC作为校准自动化血栓图（CAT）分析中的参照底物，用于测定富血小板血浆或贫血小板血浆中的内源性凝血潜能[2]。Z-Gly-Gly-Arg-AMC可在96孔板体系中用于快速鉴定直接凝血酶抑制剂或蛋白酶激活受体拮抗剂的效价排序[3]。
基于Z-Gly-Gly-Arg-AMC检测凝血酶活性[1]
本方案仅提供了一种指导原则，具体操作应根据您的实际需求进行调整。
1.溶液配制
（1）将Z-Gly-Gly-Arg-AMC固体溶解在适量的DMSO中，以配制50mM的储备溶液。将储备溶液存放在-20°C低温环境中保存，并避免反复冻融。
（2）取适量的Z-Gly-Gly-Arg-AMC储备溶液在PBS中稀释，以配制2.5mM的工作溶液。工作溶液应现配现用。
（3）取适量的CaCl2溶液，并溶解在检测缓冲液（含有20mM的HEPES、145mM的NaCl，pH 7.5）中，以配制激活缓冲液。
2. 凝血酶生成测定
（1）将血浆与Z-Gly-Gly-Arg-AMC储备溶液按体积比 4:1 混合，将混合液置于平底96孔板的孔中。向每个孔中加入100µl混合液，然后向每个孔中加入20µl激活缓冲液以触发凝血反应。Z-Gly-Gly-Arg-AMC的最终浓度为400µM。
（2）使用荧光板读数仪（Ex/Em=355/460nm）在37°C下连续测量荧光，持续30分钟，每3分钟读取一次。
3. 注意事项
（1）Z-Gly-Gly-Arg-AMC具有光敏性，操作过程应避光进行。
（2）为避免产生气泡，应在添加激活缓冲液（含CaCl2）后的10秒内进行读数。
References:
[1] Tarandovskiy I D, Artemenko E O, Panteleev M A, et al. Antiplatelet agents can promote two-peaked thrombin generation in platelet rich plasma: mechanism and possible applications[J]. PLoS One, 2013, 8(2): e55688.
| Cas No. | 66216-78-2 | SDF | |
| Canonical SMILES | Z-Gly-Gly-Arg-AMC | ||
| 分子式 | C28H33N7O7 | 分子量 | 579.6 |
| 溶解度 | Soluble in Water | 储存条件 | Store at -20°C |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
||
| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
 |
1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 1.7253 mL | 8.6266 mL | 17.2533 mL |
| 5 mM | 345.1 μL | 1.7253 mL | 3.4507 mL |
| 10 mM | 172.5 μL | 862.7 μL | 1.7253 mL |
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
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- SDS (Safety Data Sheet)
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