SYTO 9 Green Fluorescent Nucleic Acid Stain(5mM in DMSO)
(Synonyms: SYTO 9绿色荧光染料) 目录号 : GC26442SYTO 9绿色荧光核酸染料(SYTO 9 Green Fluorescent Nucleic Acid Stain)，是一款优秀的绿色荧光细胞核和染色体复染剂，能渗透进入原核和真核细胞膜。
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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SYTO 9 Green Fluorescent Nucleic Acid Stain is an excellent green fluorescent staining agent for cell nuclei and chromosomes, which can penetrate into the membranes of prokaryotic and eukaryotic cells. SYTO9 has a high affinity for binding to DNA (as well as RNA), and once bound, it exhibits a significantly enhanced fluorescence signal. The maximum excitation and emission wavelengths are 483nm and 503nm, respectively. SYTO9 is extremely suitable as a nuclear staining agent for bacterial experiments, as it can stain both live and dead cells of Gram positive and negative bacteria. SYTO 9 is often used in combination with propidium iodide (PI) for staining live/dead bacteria.
This product is provided in the form of DMSO storage solution with a concentration of 5mM. Simply dilute with appropriate physiological buffer to the working concentration for simple incubation. Suitable for mammalian cells, Gram positive and Gram negative bacteria.
SYTO 9绿色荧光核酸染料(SYTO 9 Green Fluorescent Nucleic Acid Stain)，是一款优秀的绿色荧光细胞核和染色体复染剂，能渗透进入原核和真核细胞膜。SYTO9高亲和结合DNA(以及RNA)，一旦结合后呈现明显增强的荧光信号，最大激发和发射波长分别是483nm和503nm。SYTO9极其适合用作细菌实验的核复染剂，因其对革兰氏阳性菌和阴性菌的活细胞和死细胞都能染色。SYTO 9常常与碘化丙啶(PI)联合使用，用于活/死细菌染色。
本品以DMSO储存液形式提供，浓度为5mM。只需用合适的生理缓冲液稀释到工作浓度进行简单孵育即可。适用于哺乳动物细胞、革兰氏阳性和革兰氏阴性菌。
应用示例(来自文献，仅作参考)
Ref 1) Yague P, Manteca A, Simon A, Diaz-Garcia ME, Sanchez J. New method for monitoring programmed cell death and differentiation in submerged S
treptomyces cultures. Appl Environ Microbiol.2010;76(10):3401-3404.doi:10.1128/AEM.00120-10
实验目的:建立一种简单和可靠得方法来监测和定量链霉素发酵物的细胞死亡过程，使用活细胞染料SYTO9和碘化丙啶PI。使用原理在于:SYTO9是一种细胞膜渗透性的核酸染料，能够标记所有细胞:具膜完整性和受损的细胞膜。PI只能渗透进入膜不完整的细菌。因此，在混合细菌群内，具完整细胞膜的细菌呈绿色荧光，而破损膜结构的细菌呈红色;
Fig. S. coelicolor growth curve and antibiotic (actinorhodin and undecylprodigiosin) production in submerged cultures. Confocal microscope images of key developmental stages stained with SYTO 9 and PI are shown at the top: individual hyphae of the first compartmentalized mycelium (MI; arrows indicate septation), second multinucleated mycelium hyphae (MII), and the mycelial pellet (240 μm in diameter) undergoing PCD processes in the center (red).
The transitory growth arrest phase coinciding with PCD is indicated. See text for details.
Ref 2 ) Robertson J,McGoverin C,Vanholsbeeck F and Swift S(2019) Optimisation of the Protocol for the LIVE/DEAD®BacLightT™Bacterial Viability Kit
for Rapid Determination of Bacterial Load.Front. Microbiol.10:801.doi: 10.3389/fmicb.2019.00801
实验方法(SYTO 9+PI染色):用棕色离心管稀释SYTO 9和PI使其浓度分别为33.4和400μM，置于冰上保存。分别加50μl SYTO 9和50 μl PI工作液和/或0.85%生理盐水(总体积为100μl)到0.9ml培养物内，使得SYTO 9和PI的浓度分别为1.67和20μM。对于基本培养基的优化实验，每一组活细胞和死细胞悬液分别用SYTO 9, PI和SYTO 9+PI染色。
Fig. Live/dead spectrometry on live and dead E. coli suspensions in minimal media and saline.SYTO 9 intensity in minimal media(A), PI intensity in minimal media(B), proportion of live cells in minimal media derived from the kit ratio (C), % live cells in minimal media derived from the adjusted dye ratio (D), the proportion of live cells in saline derived from the kit ratio (E) and % live cells in saline derived from the adjusted dye ratio (F) for live and dead E. colisuspensions derived from integrating at three different wavelength ranges for each dye. An R2-value was generated from a linear regression analysis of data from each wavelength range.Data presented is the median with the range from six biological replicates.
染色流程
基于实验室经验和发表方法，建议使用广谱的染色浓度来开展使用，并且根据自身的细胞类型和实验体系来优化摸索出最佳的工作浓度(见表)。
使用塑料管来稀释SYTO 9染料，由于稀释后的染料会粘附到玻璃上。总的来说，用不含磷酸盐的缓冲液来染色能得到最好的结果。塑料或玻璃器皿上残留的去污剂也有可能影响许多细胞或有机体的真实染色，导致在含或不含细胞的溶液中都能看到发明亮荧光的材料。确保用温和去污剂来清洗玻璃器皿，用热自来水完全冲洗干净，最后用去离子水清洗数次。
①离心收集细胞，用生理盐溶液或水重悬细胞。贴壁细胞(比如:哺乳动物细胞)可能在盖玻片上原位染色。使用表2内建议的工作浓度进行染色。初次实验，建议在建议浓度范围内做多个染料浓度，以确定能得到最佳染色的工作浓度。需要注意:生长培养基、细胞密度、是否存在其它细胞、和其它因素都可能影响染色。
②染色的真核细胞通常显示出弥散的细胞浆染色和细胞核染色，特别是经常看到明亮的核内小体染色。由于此染料具细胞膜渗透性，且中性pH下带净正电荷，也有可能染线粒体，活酵母菌内主要是线粒体染色。
| Cas No. | N/A | SDF | |
| 别名 | SYTO 9绿色荧光染料 | ||
| 分子式 | 分子量 | ||
| 溶解度 | 储存条件 | Store at -20°C ; protect from light | |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
||
| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
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