SYBR Safe DNA Gel Stain

电泳后染色核酸

将凝胶浸入SYBR Safe染料中。如果使用SYBR Safe凝胶染料浓缩剂，请在使用前在10,000倍的TAE或TBE缓冲液中稀释10,000X。将凝胶放在塑料容器中，例如，用吸管尖的盒子盖或家用食物存储容器。不要使用玻璃容器，因为染色溶液中的染料可能会吸附到容器壁上，从而导致不良的凝胶染色。添加足够的SYBR™Safe DNA凝胶染料以覆盖凝胶。 50 mL的体积足以染色大多数标准微凝胶。要对较大的凝胶染色，请与增加的凝胶体积成比例地增加染色溶液的体积，并确保在染色过程中将凝胶完全浸入。
孵育30分钟。用铝箔覆盖凝胶和染色溶液，或将它们置于黑暗中以避光。在定速振荡器上以50rpm的速度连续搅拌凝胶。无需脱色。

在琼脂糖凝胶中预制SYBR Safe Stain

直接在SYBR Safe DNA凝胶染料中制备琼脂糖凝胶。缓冲液中提供了SYBR Safe染色剂；在制备熔融琼脂糖时，只需用SYBR Safe染料代替缓冲液即可。如果使用10,000X SYBR Safe污渍浓缩液，请在琼脂糖凝胶缓冲液（例如1X TBE或1X TAE）中将浓缩污渍以1：10,000的比例稀释，然后将缓冲液和污渍混合物添加到粉状琼脂糖中。例如，如果运行TBE凝胶并需要30 mL熔融琼脂糖，则将3μL10,000X SYBR Safe污渍浓缩液添加到30 mL 1X TBE中，充分混合，然后添加到粉状琼脂糖中。

注意：可以在微波炉中加热琼脂糖/ SYBR Safe污渍混合物。与使用溴化乙锭的预制凝胶一样，在核酸片段中电泳时，核酸片段在凝胶中的迁移与其在无染色的凝胶中的迁移相比可能稍慢。运行凝胶。使用适合SYBR Safe凝胶染料配方的运行缓冲液。无需后期染色或脱色。

观看和拍照凝胶

可以使用标准的300 nm透照器，254 nm落射或透照器或蓝光透照器（例如Safe Imager 2.0蓝光透照器）查看染色的凝胶。 SYBR Safe染料染色的DNA也可以使用配备有紫外范围或470–530 nm激发源的成像系统进行可视化和分析。
注意：如果要切除SYBR Safe染色凝胶的条带并用于连接反应，建议使用蓝色光源（例如，Safe Imager 2.0 Blue-Light透射照明器）而非紫外线光源对凝胶进行照明。 。在某些情况下，紫外线光源与SYBR Safe染色剂结合使用会导致克隆效率降低。

可以使用Polaroid 667黑白胶卷和SYBR Safe摄影滤镜拍摄染色的凝胶。 SYPRO摄影滤镜或柯达Wratten＃9滤镜也可以正常工作。使用该膜和其中一种过滤器，SYBR Safe DNA凝胶染料可提供与溴化乙锭相同的检测灵敏度，并提供合适的过滤器。请勿使用带有SYBR Safe DNA凝胶染料的标准溴化乙锭照相滤光片。也可以使用CCD相机或基于激光的扫描仪对SYBR Safe染色剂染色的凝胶成像。