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SuperFast RT Master Mix for qPCR (gDNA remover)

目录号 : GK10031

SuperFast RT Master Mix for qPCR (gDNA remover)是一种具有超高灵敏度的逆转录试剂盒,由逆转录反应预混剂和gDNA清除Mix组成,另提供一份DEPC-ddH2O用于稀释。

SuperFast RT Master Mix for qPCR (gDNA remover) Chemical Structure

规格 价格 库存 购买数量
50 rxns
¥600.00
现货
100 rxns
¥1,020.00
现货

电话:400-920-5774 Email: sales@glpbio.cn

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Based on customer reviews.

Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.

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实验参考方法

操作流程:

1. 根据下表配制反应体系(冰上操作),总体积为10μl。

5x Sprint gDNA Remover Mix

2μl

RNA template

0.01~1μg

DEPC-ddH2O

Add to 10μl

注意:

     (1)为保证反应液配制的准确性,建议按照反应数+2的量配制预混体系,而后分装到每个反应管中,最后加入RNA;

     (2)如果需使用的RNA的量大于1μg,建议按比例扩大反应体系。

2. 将反应液轻柔混匀,短暂离心使溶液集中到管底,42℃孵育2min,然后立刻置于冰上冷却。

3. 在步骤2的管中加入以下成分, 总体积为20μl(冰上操作,可根据需要扩大反应体系):

The reaction solution of step (2)

10μl

5x M5 Sprint RT Mix

4μl

DEPC-ddH2O

6μl

4. 将反应液轻柔混匀,短暂离心使溶液集中到管底;50℃孵育5min;85℃加热5s使酶失活,置于冰上进行后续实验或冷冻保存。

 

注意事项:

1、实验过程中请全程注意避免RNase污染。

2、反转录反应完成后的体系作为模板进行Realtime PCR时,建议稀释后直接添加,添加体积不超过PCR反应体系的20%。PCR扩增使用的耐热DNA聚合酶和热循环条件需要根据目的片段的大小、GC含量、引物特性、以及对保真度的要求等进行选择。

3、长期储存可能会造成产品发生析出情况,使用之前请完全溶解并充分混匀,以防因盐离子浓度不均影响实验结果。

4、RNA模板的质量对cDNA合成效率有重要影响,请选择可靠的RNA提取/纯化方法。建议使用TRIzol Reagent (目录号:如GK20008或GK20009)制备RNA。

产品描述

SuperFast RT Master Mix for qPCR (gDNA remover)是一种具有超高灵敏度的逆转录试剂盒,由逆转录反应预混剂和gDNA清除Mix组成,另提供一份DEPC-ddH2O用于稀释。SuperFast RT Master Mix for qPCR (gDNA remover)获取cDNA是两步法RT-PCR的第一步实验,获取的cDNA能够用于常规PCR或RT-PCR。如进行RT-PCR实验,建议搭配SYBR Green qPCR Master Mix (目录号:GK10002)进行使用。

SuperFast RT Master Mix for qPCR (gDNA remover)采用了耐高温(>50℃)的极速扩增反转录酶M5 Sprint Reverse Transcriptase,能够从极低量(pg~μg级)的总RNA或poly(A) mRNA中合成cDNA,并且能够兼容GC含量高、二级结构复杂的RNA模板。

在许多情况下,经旋转柱或酸性胍-酚氯仿(AGPC)法等方法提取的RNA会包含少量的基因组DNA(gDNA),当检测目的基因中存在假基因或者无法横跨内含子设计引物时,基因组DNA将与cDNA一起被扩增,从而影响数据的准确性。SuperFast RT Master Mix for qPCR (gDNA remover)包含具有强力降解DNA能力的gDNA清除剂,有助于去除gDNA,无需纯化即可对RNA进行反转录。

 

【产品特点】

1、有效去除gDNA:只需2min,即可实现去除基因组 DNA 污染。

2、高效快速:本试剂盒采用极速扩增反转录酶和优化寡核苷酸dT引物,可实现高效逆转录,反应只需5min即可完成。

3、超高灵敏度:对极少量的 RNA 模板也可以进行良好的反转录反应。

4、超强兼容性:能够兼容GC含量高、二级结构复杂的RNA模板。

5、超低影响因素:超强对后续 qPCR 反应适用性:通过不断优化,本试剂盒对后续qPCR反应的影响降到最低。

产品组成

Components 50 rxns 100 rxns
5x gDNA Remover Mix 100 μL 200 μL
5x SuperFast RT Mix 200 μL 400 μL
DEPC-ddH2O 0.75 mL 1.5 mL

功能属性

应用&特点一种简单、快速的反转录试剂盒。
只需8-10min就可以完成gDNA的清除和cDNA的合成。
获取的cDNA能够直接作为模板进行Realtime PCR等后续操作。
运输方式蓝冰运输。
储存条件储存在-20°C,可稳定保存长达18个月。避免反复冻融。
用途仅供研究使用!不能用于人体。