PEI Transfection Reagent
(Synonyms: PEI 转染试剂) 目录号 : GC26115PEI Transfection Reagent （PEI 转染试剂）是一款基于 25 kDa PEI 改造的 DNA 转染试剂。
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
PEI Transfection Reagent is designed based on 25 kDa PEI. It is modified by introducing functional genes to enhance the binding ability of DNA, and reduced the cytotoxicity. In addition, the cell uptake and the endosome escape functions of PEI modified was enhanced significantly.
PEI Transfection Reagent is high-efficiency, low-toxicity, strong-stability, and suitable for many cell types, such as HEK-293、HEK-293T、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3、Sf9、HepG2 and HeLa et, even some hard-to-transfect cells. It can also be applied to large-scale recombinant protein expression and virus production.
PEI Transfection Reagent （PEI 转染试剂）是一款基于 25 kDa PEI 改造的 DNA 转染试剂。可广泛应用于多种细胞系的 DNA 转染，包括 HEK-293、HEK-293T、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3、Sf9、HepG2 和 HeLa 细胞等，也可应用于大规模重组蛋白表达和病毒生产等领域。
使用方法
以 24 孔板为例，其它培养装置加样体积参照表 1。
1. 准备待转染细胞
1.1贴壁细胞：转染前一天，将胰酶消化后的细胞进行铺板 (0.3-2 × 105 个细胞/孔)，至细胞密度达到 60-70% 进行细胞 转染。
1.2 悬浮细胞：转染当天，配制转染试剂-DNA 复合物之前，先进行细胞铺板，每 500 μL 生长培养基中加入 2-5 × 105 个 细胞。
注：为提高转染效率，建议使用生长状态良好且生长处于指数期、存活率 >90% 的细胞进行转染。
2. 准备转染试剂-核酸复合物
2.1取 1 μg 质粒 DNA 至 1.5 mL EP 管中，加入 1.25 μL PEI Transfection Reagent，吹吸混匀，室温孵育 3 min。
注： a) 通常情况下， DNA (μg) 和 PEI Transfection Reagent (μL) 的用量比例为 1:1.25。为提高转染效果，可在 1:1~1:2 范围内调整以优化转染效果。
b)最佳转染条件因细胞类型和培养条件不同而有所区别，可做预实验摸索最佳转染比例。
2.2 加入 100 μL 无血清基础培养基 (与培养体系一致，无血清无双抗)，轻柔混匀，室温孵育 30 min，即形成转染试剂-核 酸复合物。
注：该转染试剂-核酸复合物在室温下 4 h 内仍保持稳定。
2.3 加入 150 μL 无血清基础培养基 (与培养体系一致，无血清无双抗) 稀释复合物。
表 1. 各种培养介质下，每孔转染试剂、DNA 及培养基用量
|
细胞培养装置 |
生长培养基 (mL) |
DNA (μg) |
PEI Transfection Reagent (μL) |
无血清基础培养基 (μL) |
|
|
2.2 中使用量 |
2.3 中使用量 |
||||
|
96 孔板 |
0.1 |
0.2 |
0.25 |
20 |
30 |
|
24 孔板 |
0.5 |
1 |
1.25 |
100 |
150 |
|
12 孔板 |
1 |
2 |
2.5 |
200 |
300 |
|
6 孔板 |
2 |
2-4 |
2.5-5 |
400 |
600 |
|
60 mm 培养皿 |
4 |
3-5 |
3.75-6.25 |
800 |
1200 |
|
100 mm 培养皿 |
10 |
5-10 |
6.25-12.5 |
2000 |
3000 |
|
125 mL 摇瓶 |
30-35 |
30-35 |
37.5-43.75 |
6000 |
9000 |
|
500 mL 摇瓶 |
120-140 |
120-140 |
150-175 |
24000 |
36000 |
|
1000 mL 摇瓶 |
240-280 |
240-280 |
300-350 |
48000 |
72000 |
注：细胞转染时，可根据实际情况参考上表进行等倍放大。
3. 细胞转染
吸除原培养基，将转染试剂-核酸复合物 (250 μL) 加入每孔细胞，轻柔混匀，在培养箱中孵育 4-16 h 后，及时补充新鲜生 长培养基 (500 μL/孔)。
4. 分析转染细胞
转染细胞培养 36-48 h 后，可使用荧光检测法、Western Blot 、ELISA 、RT-PCR 、流式细胞术、报告基因等检测转染效果， 或加入筛选药物进行稳定细胞株的筛选。
存储条件
-20°C ， 12个月
避免反复冻融
| Cas No. | SDF | ||
| 别名 | PEI 转染试剂 | ||
| 分子式 | 分子量 | ||
| 溶解度 | 储存条件 | 4°C, do not freeze. | |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
||
| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。