Mito-Tracker Deep Red FM
目录号 : GC20139Mito-Tracker Deep Red FM是一种红色荧光染料，激发/发射波长为644/665 nm。
Cas No.:873315-86-7
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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Mito-Tracker Deep Red FM is a red fluorescent dye with an excitation/emission wavelength of 644/665 nm. It can selectively accumulate in the mitochondrial matrix for use in living cell mitochondrial staining and mitochondrial localization [1-2].
Mito-Tracker Deep Red FM(0-1000nM) inhibits mammosphere formation in MCF7, MDA-MB-231 and MDA-MB-468 cells[3]. Mitochondrial activity is essential for sperm function. Mito-Tracker Deep Red FM can be used to evaluate mitochondrial membrane potential (MMP) in cryopreserved alpaca sperm [4-5]. Mitochondrial activity of bone marrow mesenchymal stem cells BMSC was analyzed by Mito-Tracker Deep Red FM(200nM; 30min), and BMSC of old mice had lower mitochondrial membrane potential [6]. In HT22 cells, the Mito-Tracker Deep Red FM(500nM; 30min) can be used to visualize mitochondrial morphology [7].
References:
[1]. Buckman JF, Hernández H,et,al. MitoTracker labeling in primary neuronal and astrocytic cultures: influence of mitochondrial membrane potential and oxidants. J Neurosci Methods. 2001 Jan 15;104(2):165-76. doi: 10.1016/s0165-0270(00)00340-x. PMID: 11164242.
[2]. Mauro-Lizcano M, Esteban-Martínez L, et,al. New method to assess mitophagy flux by flow cytometry. Autophagy. 2015;11(5):833-43. doi: 10.1080/15548627.2015.1034403. PMID: 25945953; PMCID: PMC4509449.
[3]. Sargiacomo C, Stonehouse S, et,al. MitoTracker Deep Red (MTDR) Is a Metabolic Inhibitor for Targeting Mitochondria and Eradicating Cancer Stem Cells (CSCs), With Anti-Tumor and Anti-Metastatic Activity In Vivo. Front Oncol. 2021 Jul 30;11:678343. doi: 10.3389/fonc.2021.678343. PMID: 34395247; PMCID: PMC8361836.
[4]. Santiani A, Juárez J, et,al. Cryopreservation effect on sperm viability, mitochondrial membrane potential, acrosome integrity and sperm capacitation of alpaca spermatozoa detected by imaging flow cytometry. Reprod Domest Anim. 2023 Apr;58(4):560-563. doi: 10.1111/rda.14318. Epub 2023 Jan 23. PMID: 36645318.
[5]. Santiani A, Ugarelli A, et,al.Characterization of functional variables in epididymal alpaca (Vicugna pacos) sperm using imaging flow cytometry. Anim Reprod Sci. 2016 Oct;173:49-55. doi: 10.1016/j.anireprosci.2016.08.010. Epub 2016 Aug 26. PMID: 27577979.
[6]. Li X, Wang X, et,al. Dysfunction of metabolic activity of bone marrow mesenchymal stem cells in aged mice. Cell Prolif. 2022 Mar;55(3):e13191. doi: 10.1111/cpr.13191. Epub 2022 Jan 27. PMID: 35088483; PMCID: PMC8891618.
[7]. Liu Y, Yang H, et,al. An Fgr kinase inhibitor attenuates sepsis-associated encephalopathy by ameliorating mitochondrial dysfunction, oxidative stress, and neuroinflammation via the SIRT1/PGC-1α signaling pathway. J Transl Med. 2023Jul 20;21(1):486. doi: 10.1186/s12967-023-04345-7. PMID: 37475042; PMCID: PMC10360347.
Mito-Tracker Deep Red FM是一种红色荧光染料，激发/发射波长为644/665 nm。它可以选择性地积聚在线粒体基质中，用于活细胞线粒体染色和线粒体定位[1-2]。
Mito-Tracker Deep Red FM(0-1000nM)抑制MCF7、MDA-MB-231和MDA-MB-468细胞的乳腺球形成[3]。线粒体活动对精子功能至关重要。Mito-Tracker Deep Red FM可用于评估冷冻保存的羊驼精子的线粒体膜电位(MMP)[4-5]。采用Mito-Tracker Deep Red FM(200nM;30min)监测骨髓间充质细胞BMSC的线粒体活动可以观察到老年小鼠BMSC线粒体膜电位降低[6]。HT22细胞中，Mito-Tracker Deep Red FM(500nM;30min)可用于观察线粒体形态[7]。
使用说明：
储存液配置：
用DMSO制备1 mM Mito-Tracker Deep Red FM。用92 μL DMSO溶解50 μg Mito-Tracker Deep Red FM。储存液分成小剂量，-20℃或-80℃避光保存。
工作液的配制。
用培养基或合适的缓冲液将1mM储存液稀释至工作浓度，工作液需现配现用。常用的工作浓度范围是25-500nM，为防止假阳性，浓度尽量不要太高。如果细胞后续需要固定和透化染色，最好提高使用浓度。
Mito-Tracker Deep Red FM细胞染色：
贴壁细胞染色步骤：
1.将细胞铺板到细胞培养皿,加入培养基，等待细胞贴壁。
2.待细胞生长到合适密度,吸除培养液，加入适量37℃预热的含Mito-Tracker Deep Red FM的培养基。 孵育15~45min。
3.利用新鲜培养基替换上述染色液并在荧光显微镜下观察或荧光酶标仪测定荧光。
悬浮细胞染色步骤：
1. 离心沉淀细胞，吸除上清。
2. 利用37℃预热的含Mito-Tracker Deep Red FM培养基重悬细胞,孵育15~45min 。
3. 离心，吸除染色液，加入新鲜培养基重悬细胞。
4. 根据实验需求，用流式细胞仪、基于酶标仪或荧光显微镜观察。
染色后固定和透化
1. 染色后,用新鲜预热的缓冲液或生长培养基清洗细胞。
2.小心吸掉覆盖细胞的缓冲液或培养基,用含2-4%多聚甲醛的新鲜配制预热的缓冲液或培养基来固定。
3.固定之后,用缓冲液清洗细胞几次。
4.如需要透化,则用含表面活性剂如Triton X-100的缓冲液来透化细胞。一旦透化结束,用缓冲液清洗细胞并进行后续流程。（例如用含0.2% Triton X-100的PBS缓冲液诱化内皮细胞10min。)
| Cas No. | 873315-86-7 | SDF | |
| 分子式 | C34H36Cl2N2 | 分子量 | 543.57 |
| 溶解度 | DMSO : 125 mg/mL (229.96 mM; Need ultrasonic) | 储存条件 | Store at -20°C, protect from light |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
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| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 1.8397 mL | 9.1984 mL | 18.3969 mL |
| 5 mM | 0.3679 mL | 1.8397 mL | 3.6794 mL |
| 10 mM | 0.184 mL | 0.9198 mL | 1.8397 mL |
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
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