Mito-Tracker Deep Red 633
目录号 : GC20140Mito-Tracker Deep Red 633是一种新型的可以检测线粒体膜电位的深红荧光探针,能够特异性地染色活细胞中的线粒体。
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
Mito-Tracker Deep Red 633 is a novel deep red fluorescent probe that detects mitochondrial membrane potential and specifically stains mitochondria in living cells. By simply incubating with cells, it can be transported passively across the cell membrane and accumulate in biologically active mitochondria, resulting in bright deep red fluorescence.
Mito-Tracker Deep Red 633, with a molecular weight of 586.23, has a maximum excitation wavelength of 622nm and a maximum emission wavelength of 648nm. Please refer to Figure 1 for the excitation and emission spectra and structural formula of Mito-Tracker Deep Red 633.
Figure 1. Excitation and emission spectra of Mito-Tracker Deep Red 633.
Mito-Tracker Deep Red 633 can be used as a mitochondria-specific fluorescent probe. Similar to Rhodamine 123 or JC-1, Mito-Tracker Deep Red 633 staining of mitochondria is dependent on the mitochondrial membrane potential, so the probe can only stain live cells or tissues, not fixed or permeabilized cells or tissues. Please refer to Figure 2 for the staining effect of Mito-Tracker Deep Red 633 on live cells.
Figure 2. The staining effect of Mito-Tracker Deep Red 633 on mitochondria in NRK-52E cells (rat renal tubular epithelial cells). The mitochondria of Mito-Tracker Deep Red 633-stained NRK-52E cells showed magenta (pseudo-color) fluorescence (C). The nuclei were stained with Hoechst 33342. This figure is for reference only, which may vary due to different experimental conditions.
Since the accumulation of Mito-Tracker Deep Red 633 in mitochondria is dependent on the mitochondrial membrane potential, this product can also be used as an indicator probe to detect apoptosis by detecting changes in the mitochondrial membrane potential.
Based on a final working concentration of 50-200nM, each 50µg of this product can be used to prepare approximately 400-1700ml of Mito-Tracker Deep Red 633 staining solution.
Storage Conditions:
Store at -20℃ in the dark, valid for at least one year.
Precautions:
Mito-Tracker Deep Red 633 can only be used for mitochondrial fluorescent labeling of living cells, it cannot be used on fixed cells or tissues, nor can fixation and permeabilization be performed after staining.
For trace amounts of liquid, centrifuge for a few seconds before each use to collect the liquid at the bottom of the tube.
Fluorescence intensity decays. Avoid light to minimize the quenching of fluorescence.
This product is for R&D only. Not for drug, household, or other uses.
For your safety and health, please wear a lab coat and disposable gloves during the operation.
Mito-Tracker Deep Red 633是一种新型的可以检测线粒体膜电位的深红荧光探针,能够特异性地染色活细胞中的线粒体。只需简单地与细胞孵育,即可通过被动运输穿过细胞膜并聚集在有生物活性的线粒体中,从而可以产生明亮的深红荧光。
Mito-Tracker Deep Red 633,分子量为586.23,最大激发波长为622nm,最大发射波长为648nm。Mito-Tracker Deep Red 633的激发光谱和发射光谱参考图1。
图1. Mito-Tracker Deep Red 633的激发光谱和发射光谱。
Mito-Tracker Deep Red 633可以用作线粒体特异性的荧光探针。和Rhodamine 123或JC-1相似,Mito-Tracker Deep Red 633对于线粒体的染色依赖于线粒体膜电位,因此该探针只能对活的细胞或组织进行染色,不能对固定或通透后的细胞或组织进行染色。使用Mito-Tracker Deep Red 633染色活细胞线粒体的效果参考图2。
图2. Mito-Tracker Deep Red 633 (线粒体深红荧光探针)对于NRK-52E细胞(大鼠肾小管上皮细胞)线粒体的染色效果图。Mito-Tracker Deep Red 633染色的NRK-52E细胞其线粒体呈现洋红色(伪彩)荧光(图C),洋红色荧光、细胞核蓝色荧光的叠加(merge)效果见图D。其中细胞核使用Hoechst 33342 染色。实际检测效果会因实验条件、检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。
由于Mito-Tracker Deep Red 633在线粒体内的积累依赖于线粒体的膜电位,因此可以作为线粒体膜电位的指示探针,并可以通过检测线粒体膜电位的变化来检测细胞凋亡。
按最终浓度为50-200nM计算,本产品每50µg包装可以配制约400-1700ml Mito-Tracker Deep Red 633染色液。
保存条件:
-20℃避光保存,至少一年有效。
注意事项:
Mito-Tracker Deep Red 633仅可用于活细胞的线粒体荧光标记,不能用于固定后细胞或组织,染色后也不能进行固定、通透等操作。
对于微量的液体,每次使用前先离心数秒钟,使液体充分沉降到管底。
荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
需自备细胞培养板、盖玻片和载玻片等。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:
1.Mito-Tracker Deep Red 633储存液的配制:
将一管50μg Mito-Tracker Deep Red 633粉末平衡至室温后,加入426μl的无水DMSO (anhydrous dimethylsulfoxide),充分溶解后,得到浓度为0.2mM的Mito-Tracker Deep Red 633储存液。适当分装后避光保存于-20℃或更低温度。
2.Mito-Tracker Deep Red 633染色液的配制:
a.取一定量0.2mM Mito-Tracker Deep Red 633储存液按照1:4000-1:1000的比例加入到细胞培养液或适当的溶液(例如含钙镁离子的HBSS)中,使最终浓度为50nM-200nM。例如取1µl 0.2mM的Mito-Tracker Deep Red 633加入到4ml或1ml细胞培养液或适当的溶液(例如含钙镁离子的HBSS)中,混匀后即为Mito-Tracker Deep Red 633染色液,终浓度分别为50nM或200nM。
b.Mito-Tracker Deep Red 633染色液使用前需37℃预温育。
注:染色液中Mito-Tracker Deep Red 633的浓度可以根据实际情况进行适当调整。为降低非特异性荧光染色,在染色效果可以接受的范围内,建议尽量使用较低浓度的Mito-Tracker Deep Red 633。
3.贴壁细胞的线粒体染色:
a.当细胞在培养板或培养皿中培养至一定密度时,去除细胞培养液,加入步骤2中配制好的Mito-Tracker Deep Red 633染色液,37℃孵育15-30分钟。注:最佳孵育时间需根据细胞类型进行适当的优化。
b.去除Mito-Tracker Deep Red 633染色液,加入37℃预温育的新鲜细胞培养液。
c.用荧光显微镜、激光共聚焦显微镜或荧光酶标仪进行观察或检测。此时可观察到线粒体呈明亮的强荧光染色。如果染色效果欠佳,可以提高Mito-Tracker Deep Red 633染色液浓度或在推荐的时间范围内适当延长染色时间。
注:Mito-Tracker Deep Red 633染色后易淬灭,请注意尽快进行拍照等荧光检测。也可以通过降低荧光显微镜等的激发光强度(即汞灯或LED光源)或适当降低Mito-Tracker Deep Red 633染色液浓度以延缓淬灭。
4.悬浮细胞的线粒体染色:
a.1000×g离心5分钟,弃上清,用37℃预热的Mito-Tracker Deep Red 633染色液轻轻重悬细胞,37℃孵育15-30分钟。
注:最佳孵育时间需根据细胞类型进行适当的优化。
b.孵育结束后,1000×g离心5分钟,弃上清,加入37℃预温育的新鲜细胞培养液重悬细胞。
c.用荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、流式细胞仪或荧光酶标仪进行观察、分析或检测。
注:如果需要在载玻片或盖玻片上固定悬浮细胞,可先用Poly-D-lysine/多聚赖氨酸处理载玻片或盖玻片。
Cas No. | SDF | ||
分子式 | 分子量 | ||
溶解度 | 储存条件 | Store at -20°C, protect from light | |
General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限:-80°C 储存时,请在 6 个月内使用,-20°C 储存时,请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度,请将管子加热至37℃,然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
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Shipping Condition | 评估样品解决方案:配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸:配备RT,或根据请求配备蓝冰。 |
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量) | ||||||||||
给药剂量 | mg/kg | 动物平均体重 | g | 每只动物给药体积 | ul | 动物数量 | 只 | |||
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶于水的药物;不同批次药物配方比例不同,请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方) | ||||||||||
% DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
计算重置 |
计算结果:
工作液浓度: mg/ml;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL,
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL saline,混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的;
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
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