Gly-Arg-AMC (hydrochloride)
(Synonyms: Gly-Arg-7-amino-4-methylcoumarin, GR-AMC, GR-7-amino-4-methylcoumarin) 目录号 : GC45668Gly-Arg-AMC (hydrochloride)是组织蛋白酶C(Cathepsin C)的荧光底物。
Cas No.:70274-78-1
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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Gly-Arg-AMC (hydrochloride) is a fluorescent substrate for Cathepsin C. Upon hydrolysis by Cathepsin C, Gly-Arg-AMC (hydrochloride) is cleaved into Gly (glycine) and Arg-AMC (arginine-7-amino-4-methylcoumarin), with AMC emitting blue-green fluorescence. Gly-Arg-AMC (hydrochloride) can be used to detect the activity of Cathepsin C (excitation/emission: 360/460nm)[1].
References:
[1] Rubach JK, Cui G, Schneck JL, Taylor AN, Zhao B, Smallwood A, Nevins N, Wisnoski D, Thrall SH, Meek TD. The amino-acid substituents of dipeptide substrates of cathepsin C can determine the rate-limiting steps of catalysis. Biochemistry. 2012 Sep 25;51(38):7551-68.
Gly-Arg-AMC(hydrochloride)是组织蛋白酶C(Cathepsin C)的荧光底物。
Gly-Arg-AMC (hydrochloride)被组织蛋白酶C水解后，会生成 Gly（甘氨酸）和Arg-AMC(精氨酸-7-氨基-4-甲基香豆素)，AMC发出蓝绿色荧光。Gly-Arg-AMC(hydrochloride)可用于检测组织蛋白酶C的活性。(激发/发射：360/460nm)[1]。
1.缓冲液制备
50mM乙酸钠(pH 5.5)、30mM NaCl、1mM EDTA、1mM CHAPS、1mM DTT(缓冲液A)和10%(v/v) DMSO组成的10μL反应混合物。
2.荧光检测条件和设备
在21°C下，在384孔Greiner低体积聚丙烯板上测量肽解。并使用Acquest荧光计(360nm激发，460nm发射，400nm截止滤光片)测量氨基甲基香豆素（AMC）产物的荧光。
3.实验步骤
(1)在10μL上述反应混合物中加入0.8μlGly-Arg-AMC(hydrochloride)。
(2)向反应体系中加入组织蛋白酶C，使组织蛋白酶C浓度在(0.01-100nM)之间。
(3)根据荧光强度，计算组织蛋白酶C活性。
本方案仅提供一个指导，请根据您的具体需要进行修改。
References:
[1] Rubach JK, Cui G, Schneck JL, Taylor AN, Zhao B, Smallwood A, Nevins N, Wisnoski D, Thrall SH, Meek TD. The amino-acid substituents of dipeptide substrates of cathepsin C can determine the rate-limiting steps of catalysis. Biochemistry. 2012 Sep 25;51(38):7551-68.
| Cas No. | 70274-78-1 | SDF | |
| 别名 | Gly-Arg-7-amino-4-methylcoumarin, GR-AMC, GR-7-amino-4-methylcoumarin | ||
| Canonical SMILES | O=C1C=C(C)C2=C(C=C(NC([C@@H](NC(CN)=O)CCCNC(N)=N)=O)C=C2)O1 | ||
| 分子式 | C18H24N6O4.XHCl | 分子量 | 388.4 |
| 溶解度 | DMF: 30mg/mL,DMSO: 30mg/mL,DMSO:PBS (pH 7.2) (1:1): 0.5mg/mL,Ethanol: 20mg/mL | 储存条件 | Store at -20°C |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
||
| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
 |
1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 2.5747 mL | 12.8733 mL | 25.7467 mL |
| 5 mM | 0.5149 mL | 2.5747 mL | 5.1493 mL |
| 10 mM | 0.2575 mL | 1.2873 mL | 2.5747 mL |
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
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