Chlorophenol Red β-D-Galactopyranoside
(Synonyms: 氯苯酚红-Β-D-吡喃半乳糖苷,CPRG) 目录号 : GC47080Chlorophenol Red β-D-Galactopyranoside是一种长波长染料，可在570nm波长处检测吸光度。
Cas No.:99792-79-7
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
Chlorophenol Red β-D-Galactopyranoside is a long-wavelength dye, which can be detected with an absorbance at 570nm[1]. Chlorophenol Red β-D-Galactopyranoside has been widely used to detect β-galactosidase in bacteria and plants [2-3]. The anti-HIV activity of MAGI cells can be clearly detected by Chlorophenol Red β-D-Galactopyranoside with high sensitivity using standard spectrometers[4]. Chlorophenol Red β-D-Galactopyranoside showed high accuracy, allowing detection of enzyme activity at concentrations as low as 0.05mU, independent of blood contamination[5].
References:
[1] Shin H J, Park H H, Lim W K. Freeze-dried recombinant bacteria for on-site detection of phenolic compounds by color change[J]. Journal of biotechnology, 2005, 119(1): 36-43.
[2] Sicard C, Shek N, White D, et al. A rapid and sensitive fluorimetric β-galactosidase assay for coliform detection using chlorophenol red-β-D-galactopyranoside[J]. Analytical and bioanalytical chemistry, 2014, 406(22): 5395-5403.
[3] Micieta K, Tokhtaeva E, Stano J, et al. A simple and rapid method of identification of extracellular plant galactosidases[J]. Chemistry of natural compounds, 2002, 38(3): 284-287.
[4] Miyamoto F, Kawaji K, Oishi S, et al. Anti-HIV-1 activity determined by β-galactosidase activity in the multinuclear activation of an indicator assay is comparable with that by a conventional focus counting method[J]. Antiviral Chemistry and Chemotherapy, 2015, 24(2): 77-82.
[5] Pelisek J, Armeanu S, Nikol S. Evaluation of β-galactosidase activity in tissue in the presence of blood[J]. Journal of vascular research, 2000, 37(6): 585-593.
Chlorophenol Red β-D-Galactopyranoside是一种长波长染料，可在570nm波长处检测吸光度[1]。Chlorophenol Red β-D-Galactopyranoside广泛应用于细菌和植物中β-半乳糖苷酶的检测[2-3]。使用标准光谱仪时，应用Chlorophenol Red β-D-Galactopyranoside能以高灵敏度清晰检测MAGI细胞的抗HIV活性[4]。Chlorophenol Red β-D-Galactopyranoside具有高精确度，可检测低至0.05mU的酶活性，且不受血液污染的影响[5]。
基于Chlorophenol Red β-D-Galactopyranoside的β-半乳糖苷酶检测大肠杆菌方法：
1.Chlorophenol Red β-D-Galactopyranoside溶液配制：
将Chlorophenol Red β-D-Galactopyranoside（0.02至2单位/mL，1单位定义为pH7.3、37℃条件下每分钟水解1μM邻硝基苯-β-D-半乳糖苷生成邻硝基酚和D-半乳糖的酶量）溶于100mM磷酸盐缓冲液（pH6.8），添加50mM巯基乙醇和1mM氯化镁。将4wt%聚-L-精氨酸（pR）溶于双蒸水。配置完成后使用0.22μm滤膜过滤除菌。
2.细菌培养：
所有ATCC大肠杆菌25922菌株从已知细胞密度的甘油冻存管启始培养。制备0，1，10，100，1,000及10000cfu/mL六个浓度梯度的250μL培养样本，在含1mM IPTG和25μM的Chlorophenol Red β-D-Galactopyranoside+1wt% pR的胰蛋白酶大豆肉汤（TSB）中培养16小时。
3.吸光度与荧光测定：
37℃培养过程中同步监测信号变化，确定各初始菌浓所需的最短检测时间。采用酶标仪每10分钟读取一次数据（每次读数后震荡混匀），设置参数如下：荧光检测：激发波长580nm（带宽9nm），发射波长610nm（带宽20nm），增益设为最优值。吸光度检测：570nm波长，同时使用OD600值监控细菌生长情况。
References:
[1] Sicard C, Shek N, White D, et al. A rapid and sensitive fluorimetric β-galactosidase assay for coliform detection using chlorophenol red-β-D-galactopyranoside[J]. Analytical and bioanalytical chemistry, 2014, 406(22): 5395-5403.
| Cas No. | 99792-79-7 | SDF | |
| 别名 | 氯苯酚红-Β-D-吡喃半乳糖苷,CPRG | ||
| 化学名 | 2-chloro-4-[3-(3-chloro-4-hydroxyphenyl)-1,1-dioxido-3H-2,1-benzoxathiol-3-yl]phenyl β-D-galactopyranoside | ||
| Canonical SMILES | OC[C@@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](OC2=C(Cl)C=C(C(O3)(C4=CC(Cl)=C(O)C=C4)C5=C(C=CC=C5)S3(=O)=O)C=C2)O1 | ||
| 分子式 | C25H22Cl2O10S | 分子量 | 585.4 |
| 溶解度 | DMF: 30 mg/ml,DMSO: 30 mg/ml,PBS (pH 7.2): 10 mg/ml | 储存条件 | Store at -20°C |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
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| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 1.7082 mL | 8.5412 mL | 17.0823 mL |
| 5 mM | 0.3416 mL | 1.7082 mL | 3.4165 mL |
| 10 mM | 0.1708 mL | 0.8541 mL | 1.7082 mL |
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
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