BODIPY 576/589
目录号 : GC62873
BODIPY 576/589是一种红色荧光标记染料，具有独特的疏水特性，适用于标记脂质、膜或其他亲脂性化合物，最大激发和发射波长为576nm和589nm，消光系数为83000cm⁻¹M⁻¹。
Cas No.:150173-78-7
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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BODIPY 576/589 is a red-fluorescent labeling dye with distinctive hydrophobic properties that make BODIPY 576/589 ideal for tagging lipids, membranes, and other lipophilic compounds, BODIPY 576/589 absorption and emission maxima are 576nm and 589nm, respectively, and its extinction coefficient is 83000cm⁻¹ M⁻¹. The dye features a high extinction coefficient and fluorescence quantum yield, and BODIPY 576/589 remains relatively insensitive to pH changes and solvent polarity. Owing to its comparatively long excited-state lifetime, BODIPY 576/589 is suitable for fluorescence-polarization–based assays and exhibits a large two-photon cross-section for multiphoton excitation; BODIPY 576/589 is activated to label proteins, DNA, cells, etc.
References:
[1] Winter S, Kirschstein S, Miller DP. Molecular dynamics of labeled oligonucleotide probes used for the detection of point mutations in DNA. Nucleosides Nucleotides. 1999 Mar;18(3):411-23.
[2] Das S, Dey S, Patra S, et al. BODIPY-Based Molecules for Biomedical Applications. Biomolecules. 2023 Nov 30;13(12):1723.
BODIPY 576/589是一种红色荧光标记染料，具有独特的疏水特性，适用于标记脂质、膜或其他亲脂性化合物，最大激发和发射波长为576nm和589nm，消光系数为83000cm⁻¹M⁻¹。BODIPY 576/589具有高消光系数和荧光量子产率，对pH值变化和溶剂极性相对不敏感。BODIPY 576/589染料具有相对较长的激发状态寿命，可用于基于荧光偏振的测定以及多光子激发的大型双光子横截面，也可用于基于荧光寿命测量的各种方法中。BODIPY 576/589经过活化，可以标记蛋白质、DNA以及细胞等。
本方案仅提供一个指导，请根据您的具体需要进行修改。
1. 溶液配制
（1）工作液：用DMSO溶解BODIPY 576/589固体，终浓度为50mg/mL，过滤除菌。
（2）BODIPY 576/589活化：BODIPY 576/589与N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）、1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺（EDC）以1:1.2:1.5摩尔浓度充分混合 4-6 小时。采用反相 HPLC收集活化后的BODIPY 576/589。
注意：工作液必须现配现用。使用前需先使用NHS、EDC活化后方可进行后续标记实验。
2.使用BODIPY 576/589标记DNA的实验步骤
（1）引物准备：设计并合成5'端带有氨基修饰的寡核苷酸引物，确保引物序列与目标DNA互补。
（2）通过Nensorb 20柱纯化引物
（3）标记反应：将纯化后的氨基修饰引物溶于0.25M NaHCO₃-Na₂CO₃缓冲液（pH 9.0），终浓度为0.4pmol/μL（根据实验需求调整）。
（4）孵育反应：加入活化后的BODIPY 576/589（BODIPY 576/589：引物=1：10），室温避光孵育4-16小时。加入乙醇沉淀反应产物，去除未反应的游离染料和小分子杂质。
（5）产物纯化：采用反相高效液相色谱（RP-HPLC）进一步纯化标记后的DNA引物，色谱柱为ABI Aquapore RP-300（4.6mm×250mm），梯度洗脱条件为30%溶剂B（乙腈）起始，40分钟内升至100%，流速1.0mL/min。
（6）通过荧光光谱或琼脂糖凝胶电泳验证标记效率，确保荧光强度与DNA浓度匹配。
注意：
（1）本品为未活化的荧光染料，使用本品标记多肽和蛋白等生物分子需先进行羧酸活化。
（2）该方案为使用BODIPY 576/589用于DNA标记实验提供指导。可以根据其他文献和具体实验要求进行调整。操作应在无菌环境中进行，防止污染物干扰反应。避免直接接触反应试剂。
References:
[1] Metzker ML, Lu J, Gibbs RA. Electrophoretically uniform fluorescent dyes for automated DNA sequencing. Science. 1996 Mar 8;271(5254):1420-2.
[2] Wang D, Fan J, Gao X, et al. Carboxyl BODIPY dyes from bicarboxylic anhydrides: one-pot preparation, spectral properties, photostability, and biolabeling. J Org Chem. 2009 Oct 16;74(20):7675-83.
| Cas No. | 150173-78-7 | SDF | |
| 分子式 | C16H14BF2N3O2 | 分子量 | 329.11 |
| 溶解度 | DMSO : 62.5 mg/mL (189.91 mM; ultrasonic and warming and heat to 60°C) | 储存条件 | Store at 2-8°C |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
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| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 3.0385 mL | 15.1925 mL | 30.385 mL |
| 5 mM | 0.6077 mL | 3.0385 mL | 6.077 mL |
| 10 mM | 0.3038 mL | 1.5192 mL | 3.0385 mL |
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
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