BODIPY 503/512
(Synonyms: 3-肾上腺素丙酸) 目录号 : GC45796
A lipophilic, amine-reactive fluorescent probe
Cas No.:165599-63-3
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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Quality Control & SDS
- View current batch:
- Purity: >95.00%
- COA (Certificate Of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet
本方案仅提供一个指导，请根据您的具体需要进行修改。
1.染色液的制备
(1)配置储存液:使用DMSO溶解BODIPY 503/512，配置浓度为1-5mM的储存液。
注意:未使用的储存液分装后在-20℃或-80°C避光保存，避免反复冻融。
(2)配置工作液:用合适的缓冲液(如:无血清培养基或PBS)稀释储存液，配制浓度为1-5μM的工作液。
注意:请根据实际情况调整工作液浓度，现用现配。
2.细胞悬浮染色
(1)悬浮细胞：经4°C、1000g离心3-5分钟，弃去上清液，用PBS清洗两次，每次5分钟。
(2)贴壁细胞：使用PBS清洗两次，加入胰酶消化细胞，消化完成后经1000g离心3-5min。
(3)加入1mL的BODIPY 503/512工作溶液重悬细胞，37 °C避光孵育5-30分钟。不同细胞最佳孵育时间不同，请根据具体实验需求自行摸索。
(4)孵育结束后，经1000g离心5分钟，去除上清液，加入PBS清洗2-3次，每次5分钟。
(5)用预温的无血清细胞培养基或PBS重悬细胞，通过荧光显微镜或流式细胞术观察。
3.细胞贴壁染色
(1)在无菌盖玻片上培养贴壁细胞。
(2)从培养基中移走盖玻片，吸出过量的培养基，将盖玻片放在潮湿的环境中。
(3)从盖玻片的一角加入100μL的染料工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。
(4) 37 °C避光孵育5-30分钟。不同细胞最佳孵育时间不同，请根据具体实验需求自行摸索。
(5)孵育结束后吸弃染料工作液，使用预温的培养液清洗盖玻片2~3次。
4.显微镜检测：BODIPY 503/512的最大激发/发射光分别为503/512 nm。
注意事项：
①建议设置阳性对照，对照组细胞使用30μM油酸孵育8小时后进行后续实验；
②荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭；
③为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
BODIPY 503/512 is a lipophilic, amine-reactive fluorescent probe.1 It has been used to label oligonucleotide probes and primers for the quantitation of DNA and RNA by PCR and to monitor the uptake and trafficking of BODIPY-labeled proteins and other compounds within cells by fluorescence microscopy.2,3,4,1 BODIPY 503/512 has also been used to identify and sort adipocytes from mouse white and brown adipose tissue by flow cytometry.5 It displays excitation/emission maxima of 503/512 nm, respectively.1
|1. Murakami, M., Cabral, H., Matsumoto, Y., et al. Improving drug potency and efficacy by nanocarrier-mediated subcellular targeting. Sci. Transl. Med. 3(64), 64ra62 (2011).|2. Kurata, S., Kanagawa, T., Yamada, K., et al. Fluorescent quenching-based quantitative detection of specific DNA/RNA using a BODIPY• FL-labeled probe or primer. Nucleic Acids Res. 29(6), E34 (2001).|3. Bittel, A.M., Saldivar, I.S., Dolman, N.J., et al. Superresolution microscopy with novel BODIPY-based fluorophores. PLoS One 13(10), e0206104 (2018).|4. Surewaard, B.G.J., Deniset, J.F., Zemp, F.J., et al. Identification and treatment of the Staphylococcus aureus reservoir in vivo. J. Exp. Med. 213(7), 1141-1151 (2016).|5. Hagberg, C.E., Li, Q., Kutschke, M., et al. Flow cytometry of mouse and human adipocytes for the analysis of browning and cellular heterogeneity. Cell Rep. 24(10), 2746-2756 (2018).
| Cas No. | 165599-63-3 | SDF | |
| 别名 | 3-肾上腺素丙酸 | ||
| Canonical SMILES | CC1=CC(C)=[N]2C1=CC3=CC=C(CCC(O)=O)[N-]3[B+3]2([F-])[F-] | ||
| 分子式 | C14H15BF2N2O2 | 分子量 | 292.1 |
| 溶解度 | Methanol: soluble | 储存条件 | Store at -20°C |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
||
| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
 |
1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 3.4235 mL | 17.1174 mL | 34.2349 mL |
| 5 mM | 0.6847 mL | 3.4235 mL | 6.847 mL |
| 10 mM | 0.3423 mL | 1.7117 mL | 3.4235 mL |
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Wavelength-resolved fluorescence detection in capillary electrophoresis
Anal Chem 1995 Jan 1;67(1):139-44.PMID:7864386DOI:10.1021/ac00097a022
A multichannel laser-induced fluorescence detector for capillary electrophoresis is described. The detection system combines yoctomole limits of detection with the simultaneous acquisition of entire fluorescence emission spectra. An Ar/Kr mixed-gas ion laser provides great flexibility in excitation wavelengths, and a holographic grating and charge-coupled device detector combination allows a 500-nm spectral window to be acquired with 2-nm resolution. The limits of detection are 5 x 10(-14) M or 80 molecules for sulforhodamine 101 and 1.5 x 10(-13) M or 220 molecules for fluorescein in a 50 micron i.d. capillary. An electropherogram of a mixture of amino acids derivatized with both BODIPY 503/512 C3 and Bodipy 576/589 C3 demonstrates that the analytes can be differentiated on the basis of both emission characteristics and migration times. With the use of organic modifiers and other complex separation media, the spectral background increases as discrete spectral features appear; the wavelength-resolved backgrounds of a variety of common CE separation conditions are presented.