Ultra High Sensitivity ECL Kit (ECL超敏化学发光试剂盒)
目录号 : GK10008是基于鲁米诺底物的化学发光试剂盒,用于检测辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗体及其关联的抗原。
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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1. 将HRP标记的抗体孵育结束后的蛋白印迹膜漂洗干净。
2. 将ECL-A液和ECL-B液按等体积的比例混匀,即得到ECL工作液(现配现用),每5cm x 8cm的印迹膜约需要3-5 ml ECL工作液。
注:吸取A液和B液的吸头一定要分开。
3. 将印迹膜表面的液体在吸水纸上吸干,平铺在塑料膜上。
4. 将配好的ECL工作液均匀的滴在印迹膜表面,反应2分钟左右后,去除ECL工作液。
5. 将印迹膜夹在两层塑料膜之间,进行X光压片或者放入发光成像仪内拍照。
注意事项:
1.勿将超敏ECL化学发光工作液暴露在阳光或强光下,否则会导致其失活。建议将工作液保存在棕色瓶中,并避免长时间暴露在阳光下,实验室光照对工作液影响不大。
2.使用生物素/亲和素体系时,避免使用脱脂奶粉作为封闭液,因为脱脂奶粉中含有多种内源性生物素,容易产生非特异性信号。
3.使用充足的洗涤缓冲液、封闭液、抗体稀释液和底物工作液去覆盖印迹膜,以确保印迹膜处于湿润状态。使用大量的封闭液和洗涤液能减少非特异性信号的产生。
4.叠氮钠是HRP酶的抑制剂,会对反应体系产生干扰,因此缓冲液中应避免使用叠氮钠做为防腐剂。
5.印迹膜与ECL化学发光工作液孵育后5-30min内的发出的荧光是最强的,随后荧光会随着时间的延长减弱。蛋白点荧光较弱时可以适当延长曝光时间。
ECL试剂检测的核心原理为氧化反应发光:鲁米诺(lumino)作为发光底物的主要成分,在碱性条件下,通过辣根过氧化酶(HRP)催化,被H2O2氧化生成3-氨基邻苯二酸的激发态中间体,当其回到基态时发出光子,最大发射波长为425 nm。光子信号可通过X射线胶片或CCD成像仪被捕获。
GlpBio超高灵敏度ECL试剂盒可在HRP和过氧化物存在下氧化鲁米诺,从而在飞克级抗原范围内进行检测。 该反应产生延长的化学发光,可以在X射线胶片或数字成像系统上看到该化学发光。GlpBio超高灵敏度ECL试剂盒可产生强效,长寿命的信号,再加上极低的背景水平,可延长曝光时间,从而检测低丰度蛋白质。
Components | 200ml | 1000ml |
Solution A | 100 mL | 100 mL × 5 |
Solution B | 100 mL | 100 mL × 5 |
应用&特点 | 卓越的灵敏度——皮克至低飞克级的抗原检测
更高的信噪比——精准发光底物,降低背景 更利节省抗体——优化底物系统,更高抗体结合力 优异的性价比——更高的性能,更低的价格 极佳的稳定性——新型氧化剂,常温下稳定保存1年 |
运输方式 | 蓝冰运输. |
储存条件 | 储存于4°C避光, 稳定保存1年。 |
用途 | 仅供研究使用!不能用于人体。 |